Краткие сведения о результатах выполнения тем государственного задания за 2019 год

Изучение нейропластичности при цереброваскулярных заболеваниях путем использования новых биомаркеров ишемического повреждения мозга и исследования коннектома с целью выявления предикторов, разработки новых профилактических и терапевтических стратегий

Продолжается набор пациентов в остром периоде ишемического инсульта (ИИ) (n=68 на данный момент), пациентов с асимптомными стенозами (n=35 на данный момент), пациентов с паническими атаками (n=16 на данный момент). Получены первые результата клинического, нейропсихологического, нейровизуализационного и лабораторного анализов, а также лечебного воздействия гипоксически-гиперкапнических дыхательных тренировок как метода реабилитации у пациентов с ИИ. Также определены особенности функциональных связей головного мозга (коннектома (рабочей сети покоя)) с использованием функциональной МРТ у пациентов с асимптомными стенозами и пациентов с паническими атаками и получены первые результаты лечебного воздействия методами комплементарной медицины (гирудотерапия, Эриксоновская гипнотерапия).

Исследование фармакокинетики, безопасности и специфической активности внутривенного введения никотинамид рибозида при доксорубициновой кардиомиопатии.

В рамках сравнительного изучениядозозависимых эффектов однократного внутривенного введения никотинамид рибозида инбредным мышам линий Balb/с и С57Bl/6 изучена динамика массы тела, гематологические, биохимические показатели крови и антиоксидантную активность печени, а также патоморфологические изменения внутренних органов у мышей линий Balb/с и С57Bl/6 в условиях однократного внутривенного введения никотинамид рибозида; Изучена дозозависимость оказываемых эффектов.

Сопряжение нейрофизиологических и патоморфологических механизмов формирования патологической системы при структурной эпилепсии

Предложена классификация патологической высокочастотной биоэлектрической Предложена классификация патологической высокочастотной биоэлектрической активности. Разработана методики дифференциальной диагностики физиологических и патологических высокочастотных осцилляций на основе сформированной базы данных. Проведена оценка динамики изменений параметров высокочастотной биоэлектрической активности при действии ингаляционного анестетика севофлурана при резекции эпилептического очага.Методом вестернблоттинга и с последующим анализом изображений в программе ImageJ оценивали содержание белков глутамат и ГАМКергических систем. Использовали антитела к Vglut2 (1:500; Merck), Gad65 (1:1000), NR2B (1:1000; Abcam), антитела к белкаммаркёрам апоптоза (каспазы-8 (0.5 мкг/мл) и Bcl2 1:100 (Abcam); а также к GAPDH в пробах (1:10 000; Abcam), что позволяет оценивать изменения функциональной активности возбуждающей и тормозной нейрональных систем при формировании апоптотических процессов в контексте патогенеза височной фармакорезистентной эпилепсии у человека.

Циркулирующие микрочастицы в качестве эндогенных носителей нуклеиновых кислот при патогенезе воспалительных и ишемических состояний сердечно-сосудистой системы

На отчетном этапе работы разработан протокол анализа внеклеточных везикул с помощью проточной цитофлуорометрии высокого разрешения, позволяющий проводить количественные измерения субпопуляций внеклеточных везикул несущих специфичные поверхностные маркеры. Применение этого протокола в сочетании со сканирующей электронной микроскопией низкого напряжения позволило охарактеризовать изменения в характеристиках субпопуляций внеклеточных везикул при хранении препаратов тромбоцитоного концентрата. Также определено влияние нейрохирургического вмешательства и общей анестезии на динамику изменения уровней циркулирующих ядерной и митохондриальной ДНК в плазме и ликворе пациентов, а также развитие нейровоспалительных реакций и системного воспалительного ответа.

Усовершенствование технологии производства и разработка стандарта качества радиофармацевтического препарата [68Ga]-PSMA — меченого лиганда для диагностики рецидива и метастазов рака предстательной железы методом позитронной эмиссионной томографии

Проведен синтез более 150 серий препарата [68Ga]-PSMA. В целом все характеристики удовлетворяли нормативной документации. Однако было выявлено постепенное снижение радиохимической чистоты препарата. Проведенные исследования показали, что, скорее всего, это снижение связано с выщелачиванием стекла реактора. Стеклянный реактор был заменен на реактор из полипропилена. После этого получались серии препарата со стабильным значением радиохимической чистоты, которое приближается к 100 %. Часть серий препарата была использована в медицинских целях. При этом было показано, что препарат 68Ga-ПСМА при позитронно-эмиссионной томографии позволяет диагностировать первичную опухоль предстательной железы, установить стадию заболевания на дооперационном этапе, а также определить локализацию и распространённость опухолевого процесса при биохимическом рецидиве рака предстательной железы.

Тестирование эффектов сочетанного применения периодической пневматической компрессии и программируемой электромиостимуляции для лечения нарушений артериального кровотока в конечностях

В 2019 г. начался 2-й этап исследования «Тестирование эффектов сочетанного применения периодической пневматической компрессии и программируемой электромиостимуляции для лечения нарушений артериального кровотока в конечностях». В клиническое исследование включены 11 пациентов с хронической ишемией нижних конечностей, в том числе пациенты с сахарным диабетом, синдромом диабетической стопы. 5 пациентов в группе ППК + ЭМС, 6 пациентов в контрольной группе (только фармакотерапия). Методы исследования, помимо клинического и лабораторного, включают транскутанное напряжение кислорода, лодыжечное давление, тредмил-тест. Срок наблюдения по протоколу – 12 мес.

Стратификация рисков, маршрутизация, выбор оптимальной стратегии лечения и раннее прогнозирование исходов у пациентов с неотложными кардиологическими состояниями на основе систем поддержки принятия решений

Сформированы критери оценки риска для отдельных групп пациентов. Созданы модели, основанные на реальных данных. Разработаны алгоритмы стратификации риска, маршрутизации и выбора тактики лечения для отдельных групп пациентов, клинических ситуаций.

Создание технологий диагностики и оценки эффективности лечения социально-значимых заболеваний с использованием метода многокомпонентного микроанализа выдыхаемого воздуха

Заканчивается сборка прибора и доработка программного компьютерного обеспечения. Дорабатывается протокол доклинического исследования по анализу выдыхаемого воздуха с использованиием метода многокомпонентного микроанализа у больных легочным туберкулезом и раком легких.

Разработка технологий магнитоуправляемой доставки лекарственных препаратов в зону повреждения

Изучена функциональная активность эндотелия с помощью проведения проволочной миографии изолированных сосудов брыжейки крыс после введения магнитных наночастиц с различными оболочками; сохранность эндотелия по системному уровню оксида азота у крыс после введения магнитных наночастиц с различными оболочками; антиоксидантный статус и морфологические изменения сосудов у крыс после введения магнитных наночастиц с различными оболочками с помощью люминол-активиpованной хемилюминисценции и уровня перекисного окисления липидов

Разработка тест-системы для выявления генов метициллинрезистентности и оценка их распространения среди различных видов стафилококков – возбудителей нозокомиальных инфекций

Разработана тес-система для вывявления генов резистентности (mecC, mecA) различных видов стафилококков, вызывающих внутрибольничные инфекции. Тест система валидирована на контрольных штаммах.

Разработка твердофазных гранулированных препаратов для контактной гемомодуляции и активации репаративных процессов при повреждениях различной этиологии (ожоги, раневой процесс, СД)

Результаты исследования показали, что контакт крови с сорбентами ТМФС, ТМФС-К и Карбохром вызывают гемолиз эритроцитов при их контактном взаимодействии с кровью и не могут быть использованы в качестве гемоконтактных препаратов. Сорбент КХФ вызывает наименьший гемолиз эритроцитов, является наиболее удачной модификацией Силохрома С-120 и может быть рекомендован для дальнейшего исследования при создании гемоконтактных препаратов.

Исследованные на гемоконтактную активацию пленки хитозана вызывают нарастающий гемолиз эритроцитов и активируют тромбоциты, что дает основание предположить о наличии у данного препарата гемостатических свойств. Пленки хитозана могут быть использованы в клинической практике только при условии краткосрочного контакта с кровью (например, метод малообъемной гемоперфузии). Возможность использования волокон хитозана с терапевтической целью в процедуре МОГ как самостоятельно, так и в качестве нейтральной матрицы для конструирования специфических гемоактиваторов, расширяет спектр практического применения этого биополимера в эффективных медицинских схемах лечения всевозможных заболеваний у человека.

В результате проведенных исследований установлено, что активационные свойства гемоконтактных материалов целесообразно представлять в виде скоростно-временного адгезивного профиля (СВАП), который будет индивидуален для каждого твердофазного препарата. По развитию процесса адгезии можно судить об активации клеток крови, подвергшихся контакту с любыми чужеродными поверхностями, и оценивать активационные возможности этих поверхностей…

Разработка средств тераностики заболеваний сердца и сосудов на основе полимерных и белковых биодеградируемых наноразмерных носителей

Собрана конструкция для диагностики ишемических повреждений и их терапии. В качестве носителя применены НЧК, а противоишемическим средством был выбран препарат квинакрин. В качестве источника вторичного излучения использованы ИЦЗ и ККТ.

На НЧК прививался глицидиновый спейсер, на который ковалентно иммобилизовался квинакрин. Затем на этот препарат наносился хитозановый спейсер, на который, в свою очередь, иммобилизировался ИЦЗ, либо ККТ.

Зафиксировано накопление многослойной наноструктуры в зоне ишемического-реперфузионного повреждения сердца лабораторных животных, что свидетельствует о том, что эффект пассивной доставки работает на этой структуре, что может быть применено в дальнейшем для разработки препаратов тераностики.

Разработка программно- аппаратного комплекса для дистантного кондиционирования миокарда на основе локальной абдоминальной декомпрессии

Разработана установка для локальной абдоминальной декомпрессии крыс, проведена серия опытов. В экспериментальной группе животные подвергались сеансу локальной абдоминальной декомпрессии (выбранный тестируемый режим разрежения воздуха в камере — 5-6 КПа, сеанс однократный, продолжительность 5 минут, после чего к ним применяли модель острой ишемии-реперфузии миокарда. К животным контрольной группы применяли ту же модель, но без предварительной локальной абдоминальной декомпрессии. При анализе размеров зон некроза и риска на срезах миокарда (окраска синим Эванса) не было выявлено достоверной разницы. Подготовлены пробы крови для анализа ее газового и химического состава. На основе результата анализа проб крови будет скорректирован режим сеанса локальной абдоминальной дкомпрессии (увеличены уровень разряжения воздуха и число эпизодов).

Разработка подходов активации прогениторного потенциала резидентных стволовых клеток сердца с целью регенерации ткани миокарда

Мезенхимальные клетки сердца были выделены у 42 пациентов с тетрадой Фалло (ТФ) и у 14 пациентов с дефектами межжелудочковой перегородки (ДМЖП) в качестве группы сравнения. Путь Notch анализировали путем оценки экспрессии генов, связанных с Notch, с помощью количественной ПЦР. Оценивалась способность клеток к дифференцировке и пролиферации. Клетки, полученные от пациентов с тетрадой Фалло, продемонстрировали дисрегуляцию паттерна экспрессии генов, связанных с Notch, по сравнению с клетками, полученными от пациентов с ДМЖП. Была обнаружена корреляция уровня активации передачи сигналов Notch с уровнем экспрессии HEY1 / HES1 с пролиферацией и кардиогенной дифференцировкой сердечных мезенхимальных клеток, но не с клиническими параметрами и не с возрастом пациентов.

Разработка персонифицированных подходов к оценке риска тромбозов и эффекта антитромботической терапии у больных с осложнениями сердечно-сосудистых заболеваний и в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ)

В отчетном периоде был продолжена работа по исследованию активности тромбинообразования в различных клинических группах пациентов. Рассмотрены вопросы фармакодинамики и фармакокинетики у больных, получающих анти-Ха антикоагулянты, и их значение дял эффекитвности и безопасности использования этих лекарственных срежств. Проведена апробация мобильного приложения в рамках системы централизованного лекарственного мониторинга пациентов, получающих варфарин. В системе наблюдается 1600 пациентов, 500 из которых пользуется мобильным приложением, что позволило увеличить время нахождения в терапевтическом интервале до 75%. Проведено исследование активации свертывания крови у 120 женщин, вступивших в программу ВРТ. Получены данные о распространенности повышения уровня фибрин-мономера как краткосрочного маркера активации фибринообразования, выделены пациентки риска тромботических осложнений. Проведена систематизация многолетней работы по использованию проточной цитометрии в клинической лабораторной диагностике, в том числе — для оценки функции тромбоцитов, издано учебное пособие. Выпущено учебно-методическое пособие по лабораторным исследованиям при патологии гемотсаза.

Разработка новых технологий лечения нарушений полового развития детей и подростков на основе исследований молекулярно-генетических и нейроэндокринных механеинфекционных заболеваниймов задержки старта пубертата и гипогонадизма

По экспериментальной части: Завершен эксперимент «Оценка фармакологической эффективности препаратов кисспептина на экспериментальной модели гипогонадотропного гипогонадизма у самцов крыс» на базе Института экспериментальной медицины. В соответствии с протоколом: создана модель гипогонадотропного гипогонадизма на 75 новорожденных самцах крыс линии Wistar путем проведения операции — односторонней гонадэктомии. Также создана группа контроля — 20 интактных самцов крыс, сопоставимых по возрасту. В соответствии с дизайном исследования в возрасте 2-х и 4-х месяцев введены препараты кисспептина Kiss 6, Kiss 8 и Kiss 10 в дозе 6мкг/кг. Через 10 дней после введения животные подвергнуты эвтаназии, проведен забор биологических сред и органов (гонады, мышцы, кровь, головной мозг). Образцы тканей законсервированы, планируется проведение гистологического, иммуногистохимического и гормонального исследований в соответствии с дизайном эксперимента. По эксперментальной части получены предварительные данные о влиянии терапии кисспептинами разной молекулярной массы и ХГЧ на коррекцию гипогонадизма центрального генеза. Наилучшие результаты получены при введении кисспептина 10, при этом традиционно применяемая, как патогенетическая, терапия препаратами ХГЧ, не показала значимого влияния на восстановление активности гонадной оси. Наиболее позитивные результаты получены при старте терапии в более раннем возрасте — 2 мес., что ассоциировано со стартом полового развития. Для объяснения интактности таких важных параметров, как ЛГ, Ингибин В, на фоне введения кисспептинов, необходимо проведение комплексного анализа, включая исследование других андрогензависимых тканей.

По клинической части: Динамическое наблюдение инновационной технологии эффективности и безопасности комбинированной терапии препаратами ХГЧ и рекомбинантного ФСГ гипогонадотропного гипогонадизма у пациента-подростка с приобретенным послеоперационным гипопитуитаризмом. Длительность терапии — 10 мес., отмечается высокая эффективность — повышение уровня тестостерона до 20 нмоль/л, стадия пубертата Таннер4, объем гонад 15 мл (до старта терапии — 2 мл). Наблюдается легкая двусторонняя гинекомастия, расцениваемая, как пубертатная. Нежелательных побочных эффектов терапии не отмечено.

Разработка новых технологий диагностики и ведения пациентов с длительным бессознательным состоянием

Получены данные о специфичности и чувствительности теста с бензодиазепинами. Получен патент на изобретение на прогнозирование исхода при проведении пробы с золпидемом и регистрацией ЭЭГ. Изучена структура полисомнографии, динамико секреции гормонов у пациентов в ВС. Показана, что ритм секреции мелатанина в целом сохранен у пациентов с ХНС, но резко изменен ритм секреции кортизола и АКТГ. Сформулирована концепция аллостаза у пациентов ХНС на основе синтеза данных о течении нейрогуморальных процессов

Разработка новой технологии функциональной нейровизуализации для выявления ранних морфофункциональных маркеров при постреанимационной энцефалопатии и определения путей реабилитации пациентов

Получены данные магнитно-резонансной визуализации 78 пациентов с постреанимационной энцефалопатией. Проведено подробное разрозненное изучение функциональных изменений в головном мозге у пациентов до и после оперативного лечения (две временныых точки из трех) с помощью функциональной и диффузионной МРТ. Проведена доработка существующего программного алгоритма для статистического сопоставления данных клинико-неврологического, нейровизуализационного и клинико-лабораторного исследований пациентов в динамике в двух временных точках, с учетом проводимой терапии. Проведен анализ различных типов мозговой дисфункции у 53-х пациентов, перенесших аорто-коронарное шунтирование (АКШ) по поводу ишемической болезни сердца в плановом порядке, определена роль в ее развитии периоперационных факторов. Постгипоксическая энцефалопатия является частым осложнением АКШ — 67% больных (р=0,05), и представлена тремя типами расстройств: инсультом, делирием раннего послеоперационного периода, послеоперационной когнитивной дисфункцией (ПОКД). При использовании АИК выявлены факторы, способствующие развитию ПОКД: возраст стрше 65 лет, низкий когнитивный статус до операции, курение, длительное использование АИК (р<0,05). Показана значимость метода ФМРТ в диагностике постгипоксической энцефалопатии. Выявлено ослабление положительной функциональной связи медиальной префронтальной коры с задним отделом поясной извилины у пациентов с ПОКД (<0,005), у 18% пациентов выявлены зоны острой ишемии…

Разработка инновационных подходов к диагностике и лечению неинфекционных заболеваний женской половой сферы на основе методов метаболомики и метагеномики

Собрано необходимое количество образцов сыворотки крови и тканей в группах исследования и контроля. Разработана методика пробоподготовки образцов сыворотки крови и проведен экспериментальный анализ методом газовой хроматографии с масс-спектрометрией

В ходе анализа образцов определены основные группы низкомолекулярных метаболитов — потенциальных кандидатов в биомаркеры эндометриоза. На их основе сформирована панель низкомолекулярных биомаркеров, которая потенциально может быть использована для диагностики эндометриоза в клинике. Проводится подготовка по ее валидации в клинических условиях вслепую.

Разработка и оптимизация протокола тестирования токсичности веществ с молекулярной массой более 3 кДа на рыбах (Zebra fish).

При сравнение различных способов удаления хориона у эмбрионов зебрафиш, выявлены преимущества механической дехорионизации над химической: возможно проведение на ранних этапах эмбриогенеза; низкий процент летальности и мальформаций, связанных с методикой; отсутствие предшествующего взаимодействия эмбрионов с химическими реагентами. Показана зависимость тератогенного эффекта (кардиотоксичность) сублетальных доз высокомолекулярных соединений (жидкий высокомолекулярный кератин) в зависимости от сроков дехорионизации. Токсичность сублетальных доз металлсодержащих наночастиц: CuO 40-60 нм, ZnO 100 нм (МСНЧ), на интактные эмбрионы обусловлена в большей степени окислительным стрессом, который может быть снижен добавлением N-ацетилцистеина 50 ммоль/л в среду, в то время как нанотоксичность при тех же условиях у дехорионизированных эмбрионов снижается в меньшей степени. Показано уменьшение токсичности металлсодержащих наночастиц (CuO 40-60 нм, ZnO 100 нм) при использовании воды из системы содержания рыб, и частичном сохранении перивителлиновой жидкости при неполной механической дехорионизации. Данный эффект может быть вызван связыванием свободных ионов металлов и активных форм кислорода с органическими компонентами. Определен наиболее чувствительный параметр нанотоксичности у эмбрионов зебрафиш – изменение локомоторных реакций на тактильные воздействия.

Разработка и оптимизация метода криоконсервации овариальной ткани с целью сохранения репродуктивного здоровья у онкологических пациенток

Разработан и прошел экспериментальную валидацию протокол криоконсервации/витрификации ткани яичника у крыс. От 6/10 крыс к настоящему моменту получено здоровое потомство, не имеющее грубых аномалий развития. Яичники крыс, не принесших потомство в отмеченный срок (3 месяца), были собраны для гистологического исследования.

Клинический протокол криоконсервации ткани яичника у детей и подростков получил одобрение этического комитета и научно-клинического совета. Проводится подготовка по его имплементации в клиническую практику…

Разработка и доклиническое тестирование технологий флуоресцентной визуализации патологических процессов в хирургии

Получены доказательства пассивной доставки меченных индоцианином зелёным альбуминовых наночастиц в зону ишемически-реперфузионного повреждения с помощью методов флуоресцентной визуализации.

Электрофорез раствора альбумина, меченного флуорофором индоцианином зелёным, выявил что при равномолярном соотношении растворов индоцианина зелёного и альбумина (1:1), индоцианин не отделяется от альбумина, что подтверждает правильные пропорции при синтезе меченных альбуминовых наночастиц и при обосновании целесообразности предварительного связвания индоцианина зелёного с альбумином перед его использованием для визуализации ишемически-реперфузионного повреждения миокарда. Результаты сравнения интенсивности индоцианиновой-флуоресценции в зоне инфаркта миокарда свободного индоцианина с предварительно связанным с альбумином не выявили различий в интенсивности флуоресценции. Однако, требуются дальнейшие исследования необходимости предварительного связывания индоцианина с липопротеидами.

1. По разработанной флуоресцентной методике диагностики негерметичности аппаратного шва получено решение о выдаче патента на изобретение — заявка №2019107869 (015199).

Доказана эффективность и большая чувствительность разработанной методики в сравнении с, рутинно используемой, методикой внутрипросветного введения синьки.
Методика внутрипросветного введения ИЦЗ и регистрация полученных результатов, безопасна, применима и малоресурсозатратна в практической деятельности. Следующим этапом планируется применение способа в клинической практике при проведении продольной резекции желудка у человека. А так же применение при проведении различных манипуляций на полых органах (формирование различных анастомозов) в опыте на свинье.
Разработка и внедрение новых методик пациенториентированных моделей коррекции нутриционного статуса у детей
изучение нутриционного статуса у детей с врожденными пороками сердца (ВПС) в т.ч. с синдромом гипоплазии левых отделов сердца (СГЛОС) Были изучены показатели 31 новорожденного ребенка с СГЛОС. У 19% детей (n=6) нутриционный статус характризовался ЗВУР. Адекватное питание 45% новорожденных достигалось кормлением с рожка, 39% детей получали питание через зонд. Нарушение толерантности к энтеральному поступлению питательных веществ (в т.ч. с развитием некротического энтероколита) было выявлено у 16% детей, в связи с чем они получали парентеральное питание в стандартных дозировках. 2. продолжено изучение лабораторных критериев нарушения нутриционного статуса у детей с избытком массы тела и ожирением. Было проведено исследование липидограммы 100 детей и подростков с ожирением в возрасте от 4 до 17лет (1 группа 55 детей с экзогенно-конституциональным ожирением, 2 группа — 45 детей с иными клиническими формами ожирения, включая гипоталамическиое ожирение, ятрогенное ожирение, ожирение при нейроэндокринных заболеваниях, синдромальное и моногенное ожирение). Анализ показателей не выявил взаимосвязи показателей липидограммы с причинами избытка массы тела и ожирения. При этом с увеличением степени ожирения у детей достоверно повышается отклонение уровня ЛПВП, ЛПОНП, триглицеридов (p<0,005), ЛПНП (p<0,05). Однако при этом с увеличением степени ожирения уровень холестерина стремится к референсным для возраста значениям (p<0,005), что требует уточнение генеза…
Разработка и внедрение новой методики магнитно-резонансной гистеросальпингографии при бесплодии

У женщин с бесплодием выявлены структурные изменения органов малого таза, которые могут быть причиной бесплодия или фоном, на котором развивается бесплодие. МРТ-семиотика визуализируемой патологии характеризуется наличием у женщин аномалий развития, доброкачественных образований матки и придатков, различных форм эндометриоза. У 36 женщин при проведении МРТ патологических изменений органов малого таза не выявлено. У 49 женщин были выявлены патологические изменения: аномалии развития матки – у 8 (16,3%), у 26 пациенток (53,06%) – эндометриоз (аденомиоз — у 5, наружный генитальный эндометриоз у 12, сочетанный эндометриоз – у 9 женщин), а также 7 (14,2%) – лейомиомы, 8 (16,3%) – поликистоз яичников.

Разработка и внедрение нового метода неинвазивного определения содержания железа в печени и миокарде по данным магнитно-резонансной Т2*-релаксометрии для оценки эффективности терапии хелаторами железа и планирования трансплантации костного мозга

Доклиническое исследование нового баллонорасширяемого голометаллического стента с системой доставки для лечения хронического расслоения аорты III типа (по DeBakey).

Подготовлена размерная линейка опытных образцов голометаллических стентов

Выполнен первый этап доклинического исследования , имплантировано 3 голометаллических стента в аорту трем экспериментальным животным на уровне почечных артерий .Выполнено контрольные промежуточные ангиографии всем трем животным по истечении 3 месяцев после имплантации голометаллических стентов в аорту. Полученные результаты: при первичном интраоперационном осмотре забранного препарата — почечные артерии проходимы, без формирования пристеночных тромботических масс, поверхность стента покрыта слоем блестящей неоинтимы без признаков изъявлений, дефектов не выявлено. Дистальная и проксимальная часть стента без особенностей, без формирования повреждений нативной аорты. Гистологическое исследование в работе…

Разработка автоматизированной системы принятия решения для выбора тактики ведения амиодарон-индуцированного тиреотоксикоза

В 2019 году в рамках разработки контентной части автоматизированной системы принятия решения при AмИТ был продолжен поиск критериев для дифференциальной диагностики AмИТ 1 и 2 типов и смешанного AмИТ. Были получены данные о возможностях использования результатов цветного доплеровского картирования (ЦДК) для дифференциальной диагностики AмИТ. За основу были взяты ЦДК-паттерны, позволяющие оценивать характер кровотока. Всего в анализ включено 45 пациентов, получены данные о том, что ЦДК-паттерн, соответствующий резкому снижению кровотока (0), характерен для AмИТ 2 типа. Другие ЦДК-паттерны (1-3) в большей степени характерны для AмИТ 1 типа, но не исключают смешанный вариант AмИТ.Были получены данные о возможностях использования сцинтиграфии щитовидной железы с 99mTc-sestaMIBI («Технетрил») для дифференциальной диагностики AмИТ. У пациентов с подтвержденным АмИТ 2 типа захват радиофармпрепарата (РФП) отсутствовал, у пациентов с АмИТ 1 типа он был повышен, а у пациентов со смешанным вариантом АмИТ, несмотря на наличие накопления РФП в первые минуты исследования, через час отмечалось резкое его снижение. Таким образом, согласно первым полученным данным, сцинтиграфия щитовидной железы с 99mTc-sestaMIBI в отличие от других методов диагностики позволяет дифференцировать все типы АмИТ. С целью разработки лечебной тактики у пациентов с тяжелыми формами АмИТ, резистентного к медикаментозной терапии, и сопутствующей сердечно-сосудистой патологией оценивались эффективность и безопасность проведения в этих случаях тиреоидэктомии. Всего было успешно прооперировано 12 пациентов (5пациентов с АмИТ 1 типа, 6 пациентов с АмИТ 2 типа и 1 пациент со смешанным АмИТ. Ни в одном случае во время операции не отмечалось развития тиреотоксического криза…

Разработка автоматизированной системы выбора метода лечения при сахарном диабете 2 типа

Проведена оценка обучаемости пациентов с сахарным диабетом, понимания используемой медицинской терминологии, как предиктора эффективности лечения пациента . Недостаточное понимание пациентами используемой эндокринологами терминологии не влияет достоверно на гликемический контроль, но может влиять на эффективность и качество лечения. Проведен анализ иммунногенности различных препаратов инсулина. Современные методы анализа и очистки БЛП позволяют практически полностью исключить различия в способности формирования ИО между оригинальным и воспроизведенным препаратами. Проведена оценка раннего выявления диабетическоцй полинейропатии и ее патогенетической терапии с целью достижения максимальной компенсации сахарного диабета…

Прогностическое значение комплексного кариотипа и динамики клона del17p/mutTP53 при таргетной терапии хронического лимфолейкоза

Проведен анализ литературы. Закуплена реагентика. Отработаны методики. Проанализирована динамика клона c мутацией TP53 у 5 пациентов, ни одного из которых пока не было зафиксировано прогрессии заболевания (в связи с чем корреляции с прогнозом оценить невозможно). У всех пациентов отмечалось повышение доли клеток с мутацией к 12-18 мес терапии с последующим снижением к 24 мес терапии. Написан протокол наблюдательного клинического исследования IB-RU-SCOPE, которое послужит источником биообразцов для научной работы. Созданы формы электронной регистрационной карты пациента, проведено совещание исследователей. Опубликованы 3 статьи в рецензируемых журналах…

Поиск механизмов ускоренного старения сосудистой стенки и мишеней для его замедления

Закончена оценка признаков раннего сосудистого старения в динамике через 5 лет у пациентов из популяционной выборки — обследовано 70 пациентов, у которых был зарегистрирован ЕВА синдром в 2013 году.

Проведен анализ связи генетических маркеров с метаболическим синдромом по трем регионам в рамках ЭССЕ-РФ (Самара, СПБ, Оренбург), подготовлена публикация. Проведен анализ связи различных уровней давления с маркерами поражения сосудистой стенки в 4 регионах, подготовлена публикация

Проведен скрининг артериального давления в рамках международной акции МММ19, проводится анализ данных, готовится публикация. Проводится анализ распространенности и предикторов супернормального старения у пациентов в популяционной выборке и жителей Блокадного Ленинграда.

Персонифицированный подход к восстановлению репродуктивного здоровья и снижению риска соматической патологии у женщин с овариальной недостаточностью

Установлено, что дефицит и недостаточность витамина D явдляются факторами риска снижения минеральной плотности костной ткани после родов. Разработана формула для дифференциальной диагностики изолированной преэклампсии от преэклампсии, развившейся на фоне недиагностированной хронической артериальной гипертензии. Доказано более выраженное снижение процессов ангиогенеза при изолированной ПЭ по сравнению с ПЭ при ГСД по данным оценки соотношения sFlt˗1/PIGF. Установлено, что тяжелая форма преэклампсии встречается в 4,46 раз чаще при изолированной ее форме по сравнению с сочетанием с гестационным диабетом. Установлено пороговое значение с˗пептида в 3,1 нг/мл, при превышении которого индекс аугментации может служить маркером для выявления преэклампсии при развитии ранних клинических проявлений без анамнеза хронической артериальной гипертензии. Степень тяжести климактерического синдрома ассоциирована с тяжестью аффективных расстройств. МР-гистеросальпингография является минимально инвазивной, радиационно безопасной методикой МРТ с возможностью оценки проходимости маточных труб. Своевременная коррекция нарушений в системе гемостаза, проводимая с учетом всех клинических и лабораторных данных, позволяет существенно снизить риск осложнений для матери и плода, ассоциированных с беременностью. Разработаны тактики ведения возможных осложнений, способы их коррекции, оптимальные методы и время родоразрешения при многоплодной беременности при синдроме гибели одного плода. Установлен низкий риск антенатальных потерь при моноамниотическом многоплодии после достижения срока 24 недели, несмотря на присутствие в большинстве случаев коллизии пуповин, что обосновывает возможность планирования оперативного родоразрешения после достижения 36 недель беременности при неосложненном течении беременности.

Персонифицированная медицина при выборе стратегии диагностики и лечения сердечной недостаточности, обусловленной ремоделированием сердца при врожденных пороках сердца, нарушениях ритма сердца и генетически – детерминированных заболеваниях миокарда у детей

В ходе исследования, посвященного изучению гемодинамики при ВПС, были изучена группа пациентов с тотальным аномальным дренажем легочных вен, отражены особенности строения легочного венозного возврата, легочной и системной гемодинамики при различных типах порока, механизмы формирования обструкции. Показаны основные диагностические проблемы и задачи, в том числе на пренатальном уровне. Обсуждены принципы, результаты и нерешенные вопросы хирургического лечения порока, требующие дальнейшего изучения.

В группе пациентов с ВПС. Тетрадой Фалло, изучены непосредственные результаты клапан-сохраняющей радикальной коррекции. В исследование было включено 38 детей с ВПС. Тетрадой Фалло, у которых изучены отдаленные результаты. В ходе исследования было продеменстрировано, что радикальная коррекция в сочетании с современными методами реконструкции клапана легочной артерии у детей раннего возраста позволяет выполнить хирургическую коррекцию порока с сохранением собственного клапана легочной артерии.

Следующее направление – генетические детерминированные КМП. Представлены данные о ламинопатиях у детей, которые имеют широкую вариабельность, представлены клинико-диагностические параллели ламинопатий, знание которых служит поводом для проведения своевременной генетической диагностики, правильной интерпретации фенотипических изменений и определения тактики ведения этих пациентов.

Представлены результаты вариантов в гене RBM20 у детей с дилатационными кардиомиопатиями. Продемонстрировано, что варианты в гене RBM20 ассоциированы с тяжелым течением дилатационной КМП и ранним дебютом этого заболевания. Изученные в этой работе молекулярные механизмы патогенеза дилатационной КМП, ассоциированные с патогенными вариантами в генах TTN и RBM20, в будущем может оказать помощь в персонифицированных подходах к терапии генетически обусловленных форм кардиомиопатий.

Разработка и оптимизация метода криоконсервации овариальной ткани с целью сохранения репродуктивного здоровья у онкологических пациенток

Проведена оценка связи нарушений сна с сердечно-сосудистыми заболеваниями в рамках анализа данных эпидемиологического исследования ЭССЕ-РФ у 22258 респондентов. При анализе взаимосвязи нарушений сна с инсультом выявлено, что сочетание жалоб на апноэ во сне и сонливости может свидетельствовать о более тяжелых нарушениях сна у респондентов, перенесших инсульт в анамнезе. Оценка продолжительности сна показала U-образную связь с ишемической болезнью сердца и J-образную связь для инфаркта миокарда.

Проведена валидизация Детской шкалы дневной сонливости. Данные опубликованы в мултидисциплинарном журнале первого квартиля (Heliyon).

Проведен мета-анализ, выявивший распространенность нарушений дыхания во сне 73% у пациентов после ищемического инсульта и транзиторных ишемических атак, результаты опубликованы в неврологическом журнале первого квартиля (Neurology).

Оценка мутаций генов, ответственных за эпигенетическую регуляцию генома (DNMT3A, IDH1, IDH2, ASXL1), у пациентов с острым миелобластным лейкозом неинфекционных заболеванийкого и промежуточного риска в дебюте заболевания и в постиндукционном периоде.

За период исследования проведено банкирование биообразциов от 75 пациентов с впервые выявленным острым миелобластным лейкозом. У всех пациентов диагноз был верифицирован на основании стандартных критериев ВОЗ 2016г. Выполнено стандартное кариотипирование, FISH – исследование и молекулярно-генетическое исследование методом ПЦР и прямого секвенирования по Сэнгеру с определением группы риска на основании рекомендаций ELN 2017. Закуплены и получены необходимые реактивы для выделения и очистки нуклеиновых кислот, проведения ПЦР и прямого секвенирования. Выполнен анализ при помощи отработанных методик определения мутаций генов DNMT3A, IDH1, IDH2, ASXL1 у 50 пациентов с диагнозом ОМЛ. Выделение геномной ДНК из клинических образцов красного костного мозга проводили коммерческим набором «ExtractDNA Blood» (Евроген, Россия) согласно протоколу производителя. Идентификацию точечных мутаций генов DNMT3A (R882), IDH1 (R132), IDH2 (R140, R172) проводили методом прямого секвенирования на приборе Applied Biosystems 3500/3500xL. Амплификацию проводили с использованием коммерческой смеси реактивов для ПЦР «Encyclo Plus PCR kit» (Евроген, Россия). Данные секвенирования анализировали с помощью программного обеспечения SnapGene, версия 4.3 (https://www.snapgene.com), баз данных NCBI (https://ncbi.nlm.nih.gov) и Ensembl (https://www.ensembl.org).Проводится статистическая обработка поолученных даных. Их 30 проанализированных проб у одного пациента выявлена мутация IDH1 (R132H) — 3,3%. Выявленная мутация сочеталась с нормальным кариотипом и мутацией NPM1A. Мутация IDH2 (R140) выявлена у 5 из 31 проанализированного образца (16,1%). Мутация IDH2 (R172) не была выявлена ни в одном из проанализированных образцов. Мутация DNMT3A (R882) определена у 20% пациентов анализируемой группы.

Оценка клинико-лабораторных факторов риска развития сердечно-сосудистых осложнений у пациентов хроническим миелолейкозом на фоне терапии ингибиторами тирозинкиназ

В исследовании проспективно изучили кардиотоксичность ингибиторов тирозинкиназ у пациентов хроничесикм миелолейкозом. Всего было включено 150 пациентов без предшествующих сердечно-сосудистых событий, начинающих терапию ингибиторами тирозинкиназ или получающих данную терапию не менее 6 мес. В ходе обследования выявлено: пациенты, ранее получающие нилотиниб, имели больше проявлений преклинического атеросклероза (данные ПЛИ и ИМТ), чаще страдали артериальной гипертензией. Метаболические нарушения (гипергликемия, дислипидемия) также чаще выявлялась на фоне терапии нилотинибом. Однако в группе пациентов с низким риском SCORE, достоверных отличий между пациентами, получающими разные ИТК не было. Хотя у большинства пациентов были признаки миокардиальной дисфункции, частота снижения ФВ была низкой. Кроме того, у части пациентов выявлен высокий уровень про BNP. Также проведено иссследование кардиомаркера ST2. У подавляющего больнишсства пациентов он был в пределах нормы. Как про BNP, так и ST2, увеличивались у пациентов с сердечной недостаточностью. Оба показателя коррелировали с уровнем гемоглобина. Промежуточные данные были представлены на конгрессе Европейского общества кардиологов в виде постерного доклада…

Оценка безопасности и специфического действия нового лекарственного препарата для лечения и профилактики остеопороза

В рамках доклинического исследования нового препарата (ФГБУ «СЗФМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава Россиии) с целью изучения его фармакологической активности проводилась оценка процессов костного ремоделирования при сахарном диабете и остеопорозе на фоне различной сахароснижающей и антиостеопорозной терапии согласно протоколу-заявке IACUC (SF-IAC001-v2.0-Jan 2019). На эксперименте выполнено моделирование заявленных патологий. Проведено сравнительное исследование основных показателей костного ремоделирования при экспериментальном остеопорозе у крыс молодого и сенильного возраста. Показано, что эффективность предлагаемого антиостеопорозного средства более выражена у сенильных крыс и обусловлена нарастанием органической и минеральной компонентов костной ткани…

Определение химеризма в субпопуляциях гемопоэтических клеток для разработки алгоритма ранней диагностики рецидивов онкогематологических заболеваний после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Продолжен набор пациентов, систематический мониторинг линейного химеризма, получены отдаленные (более 8 мес) точки наблюдения. Проведено биобанкирование образцов, параллельная оценка иммунного статуса. Выявлена корреляция между снижением линейноспецифического химеризма по CD34+ и развитием системного рецидива в кратчайшие сроки у пациентов с ОМЛ, однако развитие молекулярного рецидива не приводило к снижению тотального и линейноспецифического химеризма. У пациентов с ХМЛ отторжение химеризма и восстановление собственного нормального гемопоэза не приводило к утрате достигнутого ответа. Однако в случае сохранения ПДХ по CD34+ снижение химеризма по CD3+ наблюдалось на фоне нарастания экспрессии BCR-ABL. В ходе исследования подтверждено, что тотальный химеризм не имеет строгой корреляции с линейно-специфическим, что подчеркивает важность исследования линейного химеризма у пациентов с онкогематологическими заболеваниями

Молекулярно-генетические механизмы ремоделирования сердца и маркеры прогноза течения ХСН у больных с постинфарктным кардиосклерозом

Продолжен набор больных с постинфарктным кардиосклерозом, включая ретро- и проспективные когорты, забор и банкирование биологического материала, исследование пациентов в динамике, проведены пилотные генетические, инструментальные и физиологические исследования на выделенных фенотипических группах исследуемых когорт, в т.ч. на фоне физической реабилитации (ФР), кардиомодулирующей терапии. Впервые было показано, что полиморфные варианты гена HSPB7 (rs1739843) могут оказывать модулирующее влияние на ассоциативные связи полиморфизмов гена MADD (rs10838692, rs2290149) и наряду с факторами кардиометаболического риска предрасполагать к различным типам постинфарктного ремоделирования миокарда левого желудочка (ЛЖ). Получены данные о влиянии ожирения на морфо-функциональные особенности миокарда и молекулярный критериальный диагностический фактор NT-proBNP в популяции наименее изученных на сегодняшний день пациентов с хронической сердечной недостаточностью на фоне промежуточной фракции выброса ЛЖ. Продемонстировано прогностическое значение биомаркеров воспаления и патоген-ассоциированного молекулярного паттерна в качестве предикторов исходов при декомпенсированной ХСН. Показано, что дозированные аэробные физические тренировки в течение 6 месяцев, подобранные на основании определения лактатного порога, у пациентов со стабильной сердечной недостаточностью с низкой фракцией выброса ЛЖ положительно влияли как на пиковое потребление кислорода, так и на морфо-функциональные характеристики скелетной мускулатуры по данным биопсии поперечно-полосатой мышечной ткани в динамике на фоне персонифицированной программы ФР.

Инновационный цифровой рентгенодиагностический комплекс для неонатологии и педиатрии

Разработаны технические средства рентгенодиагностики, в том числе, рентгеновские аппараты, цифровые системы визуализации и штативные устройства (далее рентгенодиагностические комплексы – РДК) в портативном исполнении для неонатологии и портативно-передвижном исполнении для педиатрии. Разработана методика малодозовой микрофокусной рентгенодиагностики, в том числе, определены рентгенооптические и геометрические условия съемки, различные режимы съемки, предложены специальные укладки при рентгенографии новорожденных и детей в возрасте до трех лет (неонатологии и педиатрии).

Изучение эпигеномных и микробиомных механеинфекционных заболеваниймов развития некротического энтероколита у новорожденных с целью выявления предикторов, разработки новых профилактических и терапевтических стратегий.

Продолжается банкирование биообразцов . Так, в группе недоношенных детей банкированы 92 образца сыворокки крови от 24 пациентов, 70 образцов мочи, 75 образцов кала , в группе врожденных покроков сердца — 145 образцов сыворокки крови от 30 пациентов, 58 образцов мочи, 60 образцов кала. Опубликована 1 статья, одна статья принята к публикации. Проанализирована нутритивная поддержка 30 больных с критическими врожденными пороками сердца, обнаружено, что у большинства детей потребность в энергетических субстратах удослетворяется оптимально. Необходимо создание протокола нутритивной поддержки детей с критическими врожденными пороками сердца в периоперационный период.

Изучение морфологических и электрофизиологических свойств телоцитов синусного узла и миокарда для диагностики и клеточной терапии нарушений ритма сердца

С помощью иммуногистохимического метода, электронной и лазерной конфокальной микроскопии в синусном узле и рабочем миокарде левого предсердия у пациентов с фибрилляцией предсердий (ФП) и без нее было доказано наличие телоцитов. При этом количество интерстициальных пейсмекерных клеток у пациентов с длительно персистирующей ФП было в 3 раза достоверно меньше, чем у больных без нее и в 6 раз меньше, чем в синусном узле, и имело значимые отрицательные корреляционные связи, как с наличием данного нарушения ритма, так и с площадью фиброза, липоматоза и лимфоцитарной инфильтрацией. С помощью метода локальной фиксации потенциала культур телоцитов из перифокальной зоны синусного и атрио-вентрикулярного узлов реципиентов при трансплантации сердца в интерстициальных пейсмекерах был зафиксирован калиевый ток плотностью 700 пикаАмпер/пикаФорат при деполяризации мембраны до +90млВт.

Изучение механизмов регуляции потенциал-зависимого натриевого канала Nav1.5 с целью поиска новых мишеней для терапии нарушений ритма

Исследованы биофизические характеристики Na+ тока в гетерологической экспрессионной системе, клетках CHO-K1 или НЕК293-Т, с экзогенно экспрессированными альфа-субъединицами канала Nav1.5, несущими аминокислотные замены V281A, F543L, K1419E, L1582P, E901K или Y739D. Все замены обусловлены мутациями в гене SCN5A, ассоциированными с синдромом Бругада. Анализ данных показал, что V281A, K1419E L1582P и E901K приводят к образованию функционально неактивного канала. F543L и Y739D вызывают снижение активности Nav1.5 вследствие изменений в характеристиках инактивации канала. Выполнено исследование влияния вальпроевой кислоты на канал Nav1.5. Показано снижение плотности Na+ тока вследствие блокирования канала…

Роль металлопротеаз в патогенезе опухолевого процесса и активации системы гемостаза при опухолевом росте

Разморожены и разогнаны опухолевые клетки. Подсажены культуры клеток мышам. Отобраны образцы ткани для контроля. Оценены результаты: отобраны образцы первичной опухоли и метастатических очагов через 10, 24, 27, 31 день после инъекции опухолевых клеток для дальнейших исследований.

Разработка и внедрение новых молекулярно-генетических и протеомных подходов для диагностики первичных и вторичных кардиомиопатий с целью подбора персонифицированной терапии и прогнозирования

В течение года были верифицированы новые случаи кардиомиопаий, ассоциированных с нейромышечным фнотипом, включая случаи миопатий с дебютом в детском возрасте, случай дилатационной кардиомиопатии, ассоциированой с геном миоферллина и геном ламина. Была доказана ассоцияция полиморфных вариантов генов HSPB7 и MADD с развитием диастолической дисфункции, дилатационного фенотипа и осложненного течениемГКМП

Разработка минимальноинвазивных персонифицированных технологий хирургического лечения пациентов с заболеваниями позвоночника

Данные проведенных исследований доказали, что применение малоинвазивных методов (эндоскопическая дискэктомия, лазерная термопластика) при лечении грыж межпозвонковых дисков являются альтернативой классической микродискэктомиии. В рамках настоящего исследования доказано, что эндоскопическая интраламинарная дискэктомия у пациентов с избыточной массой тела иффективнее классической микродискэктомии.

Кальцификация клапанов сердца: поиск новых мишеней для персонифицированных терапевтических воздействий

Разработан протокол выполнения и интерпретации ПЭТ/КТ с 18F-ФДГ и 18F-NaF у пациентов с аортальным стенозом.Обследовано 62 пациента с аортальным стенозом от легкого до тяжелого.При анализе аккумуляции 18F-ФДГ в створках клапана повышенной активности РФП выявлено не было. Не установлено взаимосвязи между накоплением 18F-ФДГ и степенью тяжести аортального стеноза по данным эхокардиографии. Выявлена связь между максимальной скоростью кровотока на аортальном клапане и кальциевым индексом (r=0,622, p<0,001), а также накоплением 18F-NaF. Показано, что ПЭТ/КТ с 18F-NaF отражает активность клапанной кальцификации и в дальнейшем может использоваться для оценки эффективности терапии, направленной на замедление прогрессирования заболевания. Пациенты с умеренным и тяжелым аортальным стенозом различались по относительному распределению цитотоксических Т-лимфоцитов и абсолютному количеству T-регуляторных клеток. Абсолютное количество цитотоксически Т-лимфоцитов и терминально дифференцированных CD45RA-положительных эффекторных T-клеток значительно выше у пациентов с тяжелым аортальным стенозом по сравнению с пациентами с умеренным аортальны стенозом и практически здоровыми пациентами. Результаты исследования клапанов сердца пациентов с аортальным стенозом подтверждают роль системы остеопротегерин/ RANKL/RANK в кальцификации аортального клапана. Отмечено, что у пациентов с расширением восходящего отдела аорты активность RANKL была значительно выше, что указывает на существование дополнительных механизмов, влияющих на увеличение экспрессии RANKL.

Долгосрочные эффекты дефицита витамина D: персонифицированный подход к профилактике и терапии кардиоваскулярных и метаболических заболеваний

Продолжается проспективное исследование по оценке вклада дефицита витамина D в развитие метаболических нарушений. Суммарно у 150 пациентов выполнено клиническое, лабораторное обследование, включая проведение ГТТ. У лиц с предиабетом (40 человек) определен уровень 25 (ОН) D в сыворотке крови, инсулин, расчитан индекс инсулинорезистентности. С цельюоценки влияния терапии колекациферолом на показатели метаболизма глюкозы пациенты распределены на две группы и проведена терапия колекальциферолом в дозе 4000 МЕ и 800 МЕ в сутки на протяжение 3 мес. Все включенные в исследование закончили прием препарата. В настоящее время осуществляется постановка лабораторных анализов и статическая обработка данных. Также проанализирована обеспеченность детей школьного возраста г. Санкт-Петербурга. Установлены основные метаболические нарушения, ассоциированные с ожирением и сниженной обеспеченностью витамином D. Определена группа наиболее высокого риска по развитию метаболических расстройств, включающая клинико-биохимическую триаду: Ожирение с SDS ИМТ >3, дефицит витамина D и старт пубертата со стадией по Tanner III-V.

Изучение влияния разных способов снижения веса на фертильность и микробиом женщин с синдромом поликистозных яичников и ожирением

Выявлено положительное влияние низкоуглевоной диеты в виде снижения веса, уровня инсулина натощак, а также восстановления овуляции у 26% женщин с СПКЯ. При этом обращают внимание и потенциально неблагоприятные метаболические эффекты данной диеты в виде увеличения уровня глюкозы через 1 час после нагрузки глюкозой в ГТТ и ЛПНП натощак, что требует дальнейшего изучения. При анализе бета-разнообразия состава кишечной микробиоты выявлены различия в кластеризаци образцов методом взвешенного UniFrac анализа между пациентками с СПКЯ и нормальным весом и избыточным весом/ожрением как до, так и на фоне соблюдения низкоуглеводной диеты (р= 0.024 и 0.04, соответственно).

Изучение генетических основ и разработка новых подходов диагностики и лечения изолированных и сочетанных врожденных пороков развития

Расширена коллекция образцов ткани лёгкого и периферической крови от редких пациентов детского возраста с врожденным кисто-аденоматозным пороком и секвестрацией лёгкого. Расширена когорта детей с сочетанным врожденным пороком развития сердечно-сосудистой и мочевыделительной систем, а также с врожденной сердечной патологией в составе комплексных синдромальных фенотипов. С помощью технологии сравнительной геномной гибридизации на ДНК-микрочипах (array-CGH) проведен поиск клинически значимых структурных микроперестроек хромосом в группе детей с множественными пороками развития.

Изучение механизмов вегетативной регуляции кровообращения и разработка методов диагностики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний на основе воздействия на автономную нервную систему

Изучены особенности иннервации стенки почечных артерий (гистологическое и иммуногистохимическое исследования) и определены предпосылки для проведения дистальной денервации почечных артерий. Изучены особенности иннервации стенки легочной артерий в области ее бифуркации (гистологическое и иммуногистохимическое исследования) и определены предпосылки для проведения чрескожной катетерной слективной денервации легочной артерии при легочной артериальной гипертензии. Проведена серия экспериментов по электрофизиологическому картированию легочной артерии у свиней, составлены карты распределения участков с вегетативными реакциями на высокочастотную стимуляцию. Проведена оценка гистологической характеристики и типов нервных волокон в зоне картирования. Отработана модель индукции легочной гипертензии в эксперименте на свиньях с помощью внутривенного введения синтетического аналога тромбоксана. Проведена серия экспериментов с селективной денервацией легочной артерии на основании карт распределения нервных элеменентов в стенке артерии, оценены острые гемодинамические и сосудистые реакции денервации. Выполено пилотное исследование селективной денервации легочной атертерии у пациентов с легочной артериальной гипертензией. Проведена серия экспериментов на свиньях с оценкой гемодинамических эффектов расширенной денервации почечных артерий, проведена оценка безопасности аблации в дистальных разветвлениях почечны артерий (макроскопическая и гистологическая характеристика участков радиочастотной аблации). Проведено пилотное исследование чрескожной электрической стимуляции спинного мозга с оценкой электрофизиологических и гемодинамических эффектов стимуляции. Проведено пилотное исследование стимуляции спинного мозга у пациентов с ортостатической гипотензией. Проведена оценка клинических эффектов 2-летнего применения кардиомодулирующей терапии у пациентов с хонической сердечной недостаточностью и низкой фракцией выброса левого желудочка.

Изучение роли нейровоспаления и нейрональной аккумуляции железа в патогенезе болезни Паркинсона и болезни Альцгеймера.

Воспроизведена модель болезни Паркинсона (БП), проведено курсовое введение лактоферина (ЛФ) в данной модели, оценены гематологические, неврологические (поведенческие) показатели животных, забраны некоторые органы для последующего их изучения.

Неврологические признаки БП удалось получить при следующих экспериментальных условиях: мыши самцы линии C57Bl/6 (производитель НПП «Питомник лабораторных животных» ФИБХ РАН, г. Пущино), доза МФТП 15 мг/кг, режим введения МФТП — внутрибрюшинно 1 раз в день 2 дня подряд. В выбранных экспериментальных условиях для оценки неврологических и поведенческих показателей наиболее показательными оказались следующие тесты: «открытое поле», «жердочка», «бар», «вертикальный стержень».

При введении ЛФ в дозе 300 мг/кг в течение 4-х дней (1 раз в день), начиная с первого введения МФТП, наблюдалось усиление токсического действия нейротоксина, что выражалось в смертности животных, усугублении дофаминергического дефицита (тест «вертикальный стержень») и изменении гематологических показателей (повышение количества гранулоцитов, снижение концентрации гемоглобина и среднего объема эритроцитов, снижение тромбокрита и количества тромбоцитов). При этом ЛФ способствовал ослаблению постурального синдрома (тест «бар») и уменьшению спастического синдрома в тесте «жердочка».

Таким образом, ЛФ в дозе 300 мг/кг обладает токсическим эффектом в отношении проявлений высшей нервной деятельности и системы крови. Для выяснения действия ЛФ на паркинсонический синдром требуются исследования с другими дозами ЛФ.

Воспроизведена модель болезни Паркинсона, проведено курсовое введение ЛФ в данной модели, оценены гематологические, неврологические (поведенческие) показатели животных, забраны некоторые органы для последующего их изучения.

Воспроизведена модель БП, проведено курсовое введение ЛФ в данной модели, оценены гематологические, неврологические (поведенческие) показатели животных, забраны некоторые органы для последующего их изучения.

Объект исследования: рекомбинантный человеческий апо-лактоферрин из молока трансгенных коз («CAPRABEL», предоставлен Белорусским государственным университетом и Научно-практическим центром Национальной академии наук Белоруссии по животноводству).

Разработка аллогенных опухоль-специфичных Т-лимфоцитов с химерным антигенным рецептором к антигену CD19 для терапии лимфопролиферативных злокачественных новообразований

В результате проведенных исследований в соответствии с задачей «Проведение патентных исследований» был получен следующий результат:

Установлено, что предложенный на экспертизу объект техники по состоянию действия патентных документов на июнь 2019 года обладает патентной чистотой на территории Российской Федерации. При введении в гражданский оборот на территории Российской Федерации на указанную дату объекта исследования исключительные права третьих лиц нарушаться не будут. Были получены генетические конструкции содержащие химерный антигенный рецептор (antiCD19), усилители RIAD, элементы для элиминации ТКР (shRNA), элементы элиминации HLA (ICP47), суицидальную кассету (EGFR). Конструкции были разработаны таким образом, чтобы можно было четко установить их биологическую активность на этапе 2, объединить оптимальные варианты в один вектор для начала наработки аллогенного CAR-T продукта.