Краткие сведения о результатах выполнения тем государственного задания за 2020 год

1. Изучение морфологических и электрофизиологических свойств телоцитов синусного узла и миокарда для диагностики и клеточной терапии нарушений ритма сердца

В синусном и атриовентрикулярном узлах сердца  были обнаружены телоциты, которые имеют калиевые, натриевые и кальциевые каналы, то есть способность генерировать и проводить электрический импульс. Было доказано, что при фибрилляции предсердий телоцитов становится в 3 раза меньше. Была разработана методика выделения телоцитов из культуры сердца для трансплантации при нарушениях ритма, инфаркте миокарда и других заболеваниях. В нормальном головном мозге и в глиомах также были обнаружены телоциты, иммунофенотип которых отличается от телоцитов сердца наличием экспрессии NeuroD1. Был обнаружен 6 тип глии — телоциты Ng2+. Была разработана методика получения телоцитов из культур глиом для трансплантации.

2. Разработка и внедрение новых методик пациенториентированных моделей коррекции нутриционного статуса у детей

Проведенное исследование выявило, что у детей с наследственной отягощенностью по атопии имеет место ранняя реализация клинических симптомов не только со стороны желудочно-кишечного тракта, но и кожи, а также органов дыхания, что может свидетельствовать о раннем формировании коморбидности у данного контингента пациентов и о необходимости коррекции нутриционного статуса. При этом использование гипоаллергенной формулы, несмотря на профилактическую направленность, в нашем исследовании ни у одного ребенка не привело к отсутствию реализации клинических проявлений пищевой аллергии.

Было установлено, что у детей с наследственной отягощенностью по атопии одним из методов пациентоориентированных методик профилактики ранней реализации клинических симптомов пищевой аллергии при невозможности грудного вскармливания может быть использование формул глубокого гидролиза.

3. Разработка и оптимизация метода криоконсервации овариальной ткани с целью сохранения репродуктивного здоровья у онкологических пациенток

В результате проведенного исследования была разработана методика криоконсервации яичниковой ткани; определены оптимальные параметры криопротокола, включая комбинацию проникающих и непроникающих криопротекторов, а также параметры витрификации/оттаивания овариальной ткани; продемонстрирована эффективность выбранных параметров криопротокола в эксперименте – у животных получено здоровое потомство без аномалий развития и с нормальной продолжительностью жизни; патоморфологическое исследование яичников подтвердило отсутствие негативного влияния криопротокола на строение овариальной ткани; разработанный протокол криоконсервации/реплантации размороженной ткани согласуется с международным опытом.

Полученные результаты использовались при разработке нормативных документов, обеспечивающих внедрение протокола криоконсервации овариального кортекса непосредственно в клиническую практику Центра Алмазова. Выполнены все необходимые этапы подготовки, в первую очередь среди пациенток, получающих гонадотоксичное лечение.

4. Изучение нейропластичности при цереброваскулярных заболеваниях путем использования новых биомаркеров ишемического повреждения мозга и исследования коннектома с целью выявления предикторов, разработки новых профилактических и терапевтических стратегий 

Проанализированы первые результаты, отражающие значимо лучшее восстановление неврологических функций на фоне воздействия гиперкапнически-гипоксических дыхательных тренировок (ГГДТ), по сравнению с пациентами, не получавшими данного лечения. Уточнена роль биомаркеров ишемического поражения мозга. Выявлено изменение перфузии головного мозга как у пациентов с асимптомными стенозами внутренних сонных артерий (ВСА), так и в группе пациентов без значимых каротидных стенозов, что является предиктором когнитивных и психоэмоциональных расстройств. Показано, что остеопатическая коррекция значимо изменяет функциональные связи головного мозга у пациентов с хронической головной болью напряжения (ХГБН).

5. Разработка инновационных подходов к диагностике и лечению неинфекционных заболеваний женской половой сферы на основе методов метаболомики и метагеномики

Разработан метода дериватизации нескольких классов соединений для их определения в образце биологического происхождения с помощью изобутилхлорформиата. Обоснованы параметры подготовки проб биологических образцов для определения нескольких классов соединений, определены параметры водной экстракции и её преимущества по сравнению с другими видами экстракции.

Проведена идентификация веществ, обнаруженных в результате анализа биологических проб пациентов. Определено соотношение содержаний 3 классов специфических метаболитов в пораженных тканях – моно- и дикрабоновых кислот, аминокислот.
Достоверность определения выбранных метаболитов составила более 85 % в соответствии с программным обеспечением Lab Solutions (Shimadzu).

Установлено, что при переходе от экстрактов тканей к экстрактам сыворотки абсолютные концентрации аминокислот изменяются значительно сильнее, чем их соотношения. Предположительно, при дальнейших исследованиях профиль аминокислот в пораженных тканях можно будет определять по профилю в сыворотке крови пациента.

Составлена и запатентована панель потенциальных биомаркеров эндометриоза. Планируется валидация этой панели в клинических условиях, используя метод слепого определения, с целью установить чувствительность и специфичность выбранной комбинации метаболитов.

6. Разработка новой технологии функциональной нейровизуализации для выявления ранних морфофункциональных маркеров при постреанимационной энцефалопатии и определения путей реабилитации пациентов

В результате проведенного исследования доказано, что ранними морфологическими маркерами поражения головного мозга у пациентов после аортокоронарного шунтирования по данным МРТ являются: свежие очаги ишемии головного мозга в режиме DWI, часть из которых определяется при отсутствии очаговых неврологических симптомов, и потому эти очаги являются «немыми». Ранним главным функциональным маркером поражения головного мозга по данным фМРТ у пациентов с послеоперационной когнитивной дисфункцией является дестабилизация функциональных связей в сети пассивного режима работы головного мозга преимущественно медиальной префронтальной коры с задним отделом поясной извилины (р<0,005). Ранними прогностическими нейровизуализационными маркерами можно считать активацию компенсаторных функциональных связей, количество и уровень интенсивности дестабилизированных связей головного мозга (р<0,004).

Разработан и апробирован комплекс клинико-неврологического, нейропсихологического и функционального нейровизуализационного исследования, который позволяет наиболее полно оценить морфо-функциональное состояние головного мозга пациентов до и на ранних этапах после кардиохирургического вмешательства, оценить прогноз и определить необходимость лечебных и профилактических мер.

7. Разработка новых технологий диагностики и ведения пациентов с длительным бессознательным состоянием

В результате работы впервые выделены клинические паттерны течения ХНС, впервые показана прогностическая роль перестроек активности ЭЭГ на фоне применения золпидема для прогнозирования исхода (получен патент РФ на изобретение), впервые показано, что пациенты с ХНС находятся в состоянии аллостаза, характеризующегося преобладанием симпатикотонии, инверсией ритма секреции кортизола, сохранным уровнем секреции мелатонина.

На основании результатов клинико-инструментальных и лабораторных исследований определены и детально описаны основные паттерны ВС. Предложен алгоритм для повышения точности прогноза у пациентов с  хроническим нарушением сознания на основе нейрофизиологических и нейровизуализационных методик. Отработаны методологические подходы к диагностике структурно-функциональных нарушений головного мозга с выделением неврологических паттернов у пациентов с хроническим нарушением сознания. Создан дифференцированный подход к лечению с улучшением результатов исходов. Показано, что к данной категории пациентов применима концепция аллостаза, а коррекция клинически значимых проявлений симпатической гиперактивности, системной воспалительной реакции, нейрогуморального статуса повышают вероятность восстановления сознания.

8. Разработка новых технологий лечения нарушений полового развития детей и подростков на основе исследований молекулярно-генетических и нейроэндокринных механизмов задержки старта пубертата и гипогонадизма

Терапия гипогонадотропного гипогонадизма (ГГ) у подростков мужского пола с применением комбинированной схемы препаратами ХГЧ и рекомбинантого ФСГ позволила достичь адекватной эндогенной продукции андрогенов, стимуляции секреции ингибина В и соответствующего стадии пубертата увеличения размеров гонад, что позволяет предиктировать лучший прогноз сперматогенеза и фертильности по сравнению с рутинными протоколами. В группе мальчиков с симптомами пренатального дефицита андрогенов (микрогенитализм с/без крипторхизма, проксимальной гипоспадией) применение терапии тестостероном либо ХГЧ в возрасте минипубертата вело к высокой эффективности терапии микрогенитализма (у всех купирован синдром микропениса) без клинического эффекта в отношении крипторхизма. В результате эксперимента валидизирована модель гипогонадотропного гипогонадизма, доказательно обоснована сильная корреляция рецепторов кисспептина в гонадах с гонадотропинами, особенно ФСГ. Введение кисспептина 10 в возрасте препубертата имеет лучший эффект на динамику гормонов гонадной оси по сравнению с кисспептином 6,8 и ХГЧ, но требует продолжения исследований.

Разработаны и апробированы методы оценки молекулярных механизмов активации различных звеньев гемостаза в экспериментальных и клинических условиях при сердечно-сосудистых заболеваниях и в программах ВРТ.  Разработана клинико-лабораторная модель мониторинга антитромботической терапии у пациентов всокого риска. Выявлены группы повышенного риска тромботических осложнений с учетом механизмов активации свертывания крови и использования модели управления для оптимизации антитромботической терапии.

9. Разработка персонифицированных подходов к оценке риска тромбозов и эффекта антитромботической терапии у больных с осложнениями сердечно-сосудистых заболеваний и в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ)

В процессе работы изучались фундаментальные механизмы активации тромбоцитов – микровезикуляция, носительство молекулярных знаков на поверхности микровезикул, лабораторные критерии генерации тромбина, определялись возможности персонифи-цированной оценки тромботического риска и подхода к антитромботической терапии, в том числе у пациентов с COVID-19 и в рамках клинико-лабораторной модели мониторинга этих больных с использованием телемедицинских технологий.

В результате проведенного исследования показано практическое значение и лабораторные возможности оценки активности тромбоцитов на модели тромбоцитарного концентрата и в клинической практике. Доказано значение активации плазменного гемостаза как потенциальной мишени антитромботической терапии у больных со стабильной ишемической болезнью сердца и инфарктом миокарда в анамнезе. Раскрыт один из механизмов активации свертывания при COVID-19. Апробирована и усовершенствована клинико-лабораторная модель наблюдения за больными, получающими антикоа-гулянтную терапию.

Разработана клинико-лабораторная модель мониторинга антитромботической терапии у пациентов высокого риска.  Отработаны методы оценки молекулярных механизмов активации различных звеньев гемостаза в экспериментальных и клинических условиях при сердечно-сосудистых заболеваниях и в программах ВРТ. Выявлены группы повышенного риска тромботических осложнений с учетом механизмов активации свертывания крови и использование модели управления для оптимизации антитромботической терапии.

10. Разработка подходов активации прогениторного потенциала резидентных стволовых клеток сердца с целью регенерации ткани миокарда

Согласно плану исследования на данном этапе мы проанализировали активность сигнального пути Notch и генов раннего ремоделирования в постинфарктных тканях и клетках крыс и провели анализ их транскриптома для оценки изменений в профилях экспрессии генов.

Было установлено, что острый гипоксический стресс оказывает кратковременную активацию регенеративного потенциала МКС, и что в этот процесс вовлечены компоненты сигнального пути Notch, а также гены Hif-1a, Bmp2 и Runx2. Кроме того отмечено, что постинфарктные мезенхимные клетки сердца обладают повышенным потенциалом к пролиферации и дифференцировке, а гипоксическое воздействие in vitro в мезенхимных клетках приводит к активации сигнального пути Notch и Runx2/Bmp2. В то же время экзогенная активация сигнального пути Notch приводит к активации Runx2, но не Bmp2.

Полученные результаты показывают, что передача сигналов Notch является одним из ключевых факторов, ответственных за развитие и восстановление сердца. Полученные данные способствуют последующему углублённому рассмотрению и активному изучению феномена активации МКС и возможности их использования в терапии, позволят разработать методики активации регенерации ткани миокарда.

11. Разработка программно-аппаратного комплекса для дистантного кондиционирования миокарда на основе локальной абдоминальной декомпрессии

Разработана установка для биомикроскопии сосудов кишечника и брыжейки крыс в условиях ЛОД, предложен алгоритм обработки полученных цифровых данных. Исследован механизм физиологического ответа на сеанс локальной абдоминальной декомпрессии. Выявлено позитивное влияние локальной абдоминальной декомпрессии на содержание оксида азота в крови, дегрануляцию тучных клеток в брыжейке и на активность эндотелиальной NO-синтазы.

Определена тенденция к повышению активности eNOS и пролонгированной выработке NO. Определено, что использование обозначенных диапазонов (1,2-2 КПа или 0,2-0,3 PSI) разрежения воздуха в декомпрессионной камере не провоцирует возникновение петехиальных кровоизлияний, что подтверждает безопасность метода. Внедрена экспериментальная методика проведения локальной абдоминальной декомпрессии у лабораторных животных (крыса).

Метод локальной абдоминальной декомпрессии может использоваться как компонент физиологической терапии для корректировки патологических процессов, в том числе связанных с нарушением функции эндотелия, например, при ОРВИ.

12. Разработка средств тераностики заболеваний сердца и сосудов на основе полимерных и белковых биодеградируемых наноразмерных носителей

Было проведено исследование эффективности многослойной наноструктуры iv vivo на SPF крысах стока Wistar на флуоресцентном томографе и на модели острого инфаркта миокарда.

Разработана многослойная наноструктура на основе полимерных и белковых биодеградируемых наноразмерных носителей для тераностики ишемических повреждений. Проведена сборка многослойной конструкции для тераностики ишемических повреждений и отмечена ее эффективность по данным предварительных исследований.

Результаты являются новыми и могут быть использованы для разработки многослойных наноструктур для диагностики и лечения ишемических повреждений миокарда.

13. Разработка твердофазных гранулированных препаратов для контактной гемомодуляции и активации репаративных процессов при повреждениях различной этиологии (ожоги, раневой процесс, СД)

Разработаны изделия медицинского назначения в виде твердофазных гранулированных препаратов (сверхсшитый полистирол марки MN-202, кремнеземы КСК-2 и Силохром С-120, пленки и волокна хитозана) для возможного использования в качестве нейтральных матриц в клинической практике при лечении ожогов, раневых процессов и СД методом малообъёмной гемоперфузии. Наиболее перспективным препаратом является сверхсшитый полистирол марки МN-202.

В результате исследования спектральных характеристик плазмы крови человека после контакта с Силохром С-120 и его химически модифицированными производными ТМФС, ТМФС-К, КХФ и Карбохром in vitro показано, что сорбенты ТМФС, ТМФС-К и Карбохром вызывают  гемолиз эритроцитов и не могут быть использованы в качестве гемоконтактных препаратов. Препарат КХФ является перспективной модификацией Силохрома С-120 и может быть рекомендован для дальнейшего исследования при создании гемоконтактных препаратов.

Предварительные исследования пленок и волокон хитозана  в условиях in vitro показали, что данный биополимер можно использовать самостоятельно с терапевтической целью в процедуре малообъемной гемоперфузии. Модификация матричных препаратов  фуллеренами С60, углеродными нанотрубками и нанофибриллами хитина позволит корректировать активационные свойства и характеристики гемосовместимости при их использовании в новой  медицинской технологии — малообъемной гемоперфузии. Области применения данной технологии — комбустиология, травматология, эндокринология, терапия, реабилитационная медицина.

14. Разработка тест-системы для выявления генов метициллинрезистентности и оценка их распространения среди различных видов стафилококков – возбудителей нозокомиальных инфекций

Проведена оценка распространенности метициллин-резистентности среди различных видов коагулазо-негативных и золотистого стафилококков. Выявлена низкая частота метициллинрезистентности среди госпитальных штаммов S. aureus (10,9 %) и высокая среди коагулазонегативных стафилококков (77,4 %).

Разработана тест-система по определению генов метициллинрезистентности стафилококков (mecA и mecC) с детекцией продуктов амплификации методом электрофореза.

Показана 100 % эффективность тест-системы в выявлении метициллин-резистентности различных видов стафилококков.

Проведена оценка распространенности генов mеcA и mecC среди стафилококков – возбудителей госпитальных инфекций. Резистентность к метициллину исследованных штаммов золотистого и коагулазонегативных стафилококков была во всех случаях связана с присутствием гена mеcA. Контрольные штаммы, имеющие в составе ген mecC, были эффективно дискриминированы разработанной тест-системой.

15. Создание технологий диагностики и оценки эффективности лечения социально-значимых заболеваний с использованием метода многокомпонентного микроанализа выдыхаемого воздуха

Избранный подход динамической регистрации изменений концентрации ЛОС в ходе функционального теста с физической нагрузкой в целом позволяет дифференцировать состояние нормы и патологии сердечно-сосудистой системы. Для этого был выделен ряд показателей, основанных на характерных особенностях формы кривой ацетона, присущих нормальному и патологическому состоянию. Была произведена оценка воспроизводимости как приведённых показателей, так и всей кривой ацетона в целом. В результате оказалось, что предложенная методика регистрации концентрации ацетона в выдыхаемом воздухе в процессе выполнения физической нагрузки позволяет получать воспроизводимые результаты, как минимум достаточные для дифференциации состояния сердечно-сосудистой системы. Кроме того, было произведено сравнение кривых ацетона для здоровых лиц, проходивших тестирование по различным протоколам, в результате чего можно сделать предположение о независимости от вида нагрузочного протокола формы кривой ацетона и значений найденных показателей.

Было доказано, что ацетон может рассматриваться в качестве маркера функционального состояния пациента с ХСН, однако требуется проведение дополнительных исследований для решения задачи распознавания псевдонормализации найденных показателей у пациентов с III ф.кл.

16. Стратификация рисков, маршрутизация, выбор оптимальной стратегии лечения и раннее прогнозирование исходов у пациентов с неотложными кардиологическими состояниями на основе систем поддержки принятия решений 

Проведён анализ взаимодействия подразделений внутри медицинской организации при оказании экстренной помощи пациентам с острым коронарным синдромом, анализ координации потоков пациентов для обеспечения оптимальной доступности помощи и моделирование процесса управления потоками.

Отработано взаимодействие подразделений внутри медицинской организации при оказании экстренной помощи пациентам с острым коронарным синдромом. Предложены варианты координации потоков пациентов для обеспечения оптимальной доступности помощи и моделирования процесса управления потоками пациентов с неотложными кардиологическими состояниями на основе систем поддержки принятия решений. Показано, что в процессе оказания медицинской помощи пациентам с неотложными состояниями формируются устойчивые связи между различными подразделениями, поддающиеся количественной оценке и комплексно влияющие на формирование потоков пациентов и возникновение задержек с оказанием помощи.

Результаты исследования являются основой для построения алгоритмов и моделей прогнозирования риска развития неблагоприятных событий, связанных с основным и сопутствующими заболеваниями у пациентов с неотложными кардиологическими состояниями.

Подготовлены рекомендации по выбору оптимальной стратегии лечения и раннего прогнозирования исходов у пациентов с неотложными кардиологическими состояниями на основе систем поддержки принятия решений.

17. Тестирование эффектов сочетанного применения периодической пневматической компрессии и программируемой электромиостимуляции для  лечения нарушений артериального кровотока в конечностях

Выявлено, что сочетанное применение периодической пневматической компрессии (ППК) и электромиостимуляции (ЭМС) у пациентов с  нарушениями артериального кровотока в конечностях приводит к улучшению показателей перфузии конечности (возрастает tcpO2  и увеличивается время безболевой ходьбы), однако не влияет на лодыжечно-плечевой индекс и заживление трофических язв. Более эффективно использование высокого компрессионного давления в манжете при проведении периодической пневматической компрессии (ППК), чем применение низкого компрессионного давления.

Эффективнее применение более длительного периода компрессии (3 мин) для  улучшения микроциркуляции по  сравнению с коротким временем компрессии. Дополнение ППК электромиостимуляцией не приводит к дополнительному увеличению показателей микроциркуляции в конечности.

18. Сопряжение нейрофизиологических и патоморфологических механизмов формирования патологической системы при структурной эпилепсии

Получены новые данные при оценке сопряжения нейрофизиологических и патоморфологических механизмов формирования патологической системы при структурной эпилепсии.

Выявлено сопряжение нейрофизиологических и патоморфологических механизмов формирования патологической системы при структурной эпилепсии. Показано, что склероз гиппокампа не всегда является патогномоничным признаком вовлечения его в эпилептическую систему. Дальнейшие исследования по теме будут сфокусированы на анализе гетерогенности структуры эпилептических очагов, что может обуславливать полиморфность проявлений эпилепсии.

Результаты использованы для построения диагностических алгоритмов предоперационного обследования больных с фармакорезистеной височной эпилепсией.

19. Исследование фармакокинетики, безопасности и специфической активности внутривенного введения никотинамид рибозида при доксорубициновой кардиомиопатии

Разработана модель доксорубициновой кардиомиопатии на крысах без снижения фракции выброса и со снижением фракции выброса. Полученные результаты  стали основой для разработки современной модели доксорубициновой кардиомиопатии, отвечающей условиям, необходимым для разработки и доклинической оценки новых лекарственных препаратов, предназначенных для профилактики и снижения кардиотоксических эффектов препаратов антрациклинового ряда. Отработаны подходы к верификации поражения миокарда, в том числе фиброзных изменений и сравнение различных протоколов. В рамках реализации этапа произведена верификация модели опухоли, произведена оценка системного влияния опухоли на различные жизненные показатели мышей.  Полученные в ходе настоящего исследования экспериментальные данные, вносят свой вклад в понимание развития опухолевого процесса и метастазирования меланомы, что позволяет говорить о научной новизне и практической значимости поставленного эксперимента.

20. Роль металлопротеаз в патогенезе опухолевого процесса и активации системы гемостаза при опухолевом росте

В ходе исследования изучена динамика количества и локализацию метастазов меланомы кожи in vivo, определены уровни матриксной металлопротеиназы-9, 14 и тканевого ингибитора TIMP-4 в клетках первичной опухоли меланомы в динамике роста опухоли, а также проведен корреляционный анализ взаимосвязи между экспрессией матриксных металлопротеиназ-9, 14 и TIMP-4 в клетках меланомы. Легочные метастазы, как и метастазы печени были локализованы по всем частям ткани органов, с каждым днем значительно возрастали в количестве. На 35 день число метастазов в легких и в печени было максимально. Степень метастазирования в печени была существенно ниже, чем в легких. Появление метастатических очагов в легких и печени сопровождается угнетением жизненных функций организма, что в последствии приводит к дальнейшему летальному исходу.

Установлено, что экспрессия MMP -9 в образцах опухоли достигала максимального уровня на 35 день после перевивки. Уровень активности MMP -14 и TIMP -4 был существенно снижен на протяжении всей динамики опухолевого процесса.

Корреляционный анализ выявил прямую положительную зависимость между уровнями MMP-14 и TIMP-4, а также показал слабую зависимость между уровнями MMP-9 и TIMP-4 и отсутствие зависимости между MMP-9 и MMP-14, соответственно.

Проведено моделирование опухолевого процесса с использованием опухолевой линии меланомы мыши В16 на мышах С57Bl/6 и распределение животных по экспериментальным группам.

21. Разработка и внедрение новых молекулярно-генетических и протеомных подходов для диагностики первичных и вторичных кардиомиопатий с целью подбора персонифицированной терапии и прогнозирования

Проанализированы генетические причины случаев некомпактного миокарда с дебютом заболевания в детском возрасте, выявлено превалирование вариантов в цитоскелетных и структурных генах при данной патологии и показана связь суправентрикулярных нарушений ритма с мутациями и вариантами неопределенной значимости в генах ионных каналов.

Показана роль вариантов в гене тайтина (TTN) в развитии семейных случаев некомпактного миокарда, а также в развиии ГКМП с трансформацией в дилатационный фенотип.

22. Разработка и внедрение новой методики магнитно-резонансной гистеросальпингографии при бесплодии

У женщин с бесплодием выявлены структурные изменения органов малого таза, которые могут быть причиной бесплодия или фоном, на котором развивается бесплодие. МРТ-семиотика визуализируемой патологии характеризуется наличием у женщин аномалий развития, доброкачественных образований матки и придатков, различных форм эндометриоза. У 36 женщин при проведении МРТ патологических изменений органов малого таза не выявлено. У 49 женщин были выявлены патологические изменения: у 8 пациенток (16,3 %) – аномалии развития матки, у 26 (53,06 %) – эндометриоз (аденомиоз — у 5, наружный генитальный эндометриоз — у 12, сочетанный эндометриоз – у 9), а также  7 женщин (14,2 %) – лейомиомы, у 8 (16,3 %) – поликистоз яичников.

23. Разработка автоматизированной системы принятия решения для выбора тактики ведения амиодарон-индуцированного тиреотоксикоза

Полученные предварительные результаты оценки возможности сцинтиграфии щитовидной железы с Тс99m SestaMIBI в дифференциальной диагностике различных вариантов АиТ, включая смешанный, продемонстрировали высокую информативность данного метода, однако требуется верификация полученных данных на большем количестве наблюдений.

Показано, что применение тиреоидэктомии в случаях амиодарон индуцированного тиреотоксикоза у тяжелых кардиоваскулярных пациентов, когда достижение эутиреоза в кратчайшие сроки затруднено, позволяет купировать тиреотоксикоз и улучшить прогноз при условии наличия мультидисциплинарной команды высококвалифицированных хирургов, анестезиологов, эндокринологов и кардиологов.

Созданы предпосылки для подготовки автоматизированной системы принятия решения при амиодарон-индуцированном тиреотоксикозе на основе разработанной контентной части. Подготовлен проект федеральных клинических рекомендаций по диагностике и лечению амиодарон-индуцированной дисфункции щитовидной железы.

24. Поиск механизмов ускоренного старения сосудистой стенки и мишеней для его замедления

Выявлено, что исходно значимо более высокие уровни артериального давления, инсулинорезистентности, липопротеинов низкой плотности и мочевой кислоты, а также рост уровня глюкозы с течением времени ассоциируются с трансформацией метаболически здорового в нездоровый фенотип у лиц ожирением через 6,5 лет наблюдения. Для респондентов со здоровым сосудистым старением по сравнению с респондентами с преждевременным сосудистым старением характерно употребление значимо меньшего количества соли, колбасных изделий и большее потребление мяса птицы, молочных продуктов и свежих овощей/фруктов. В группе лиц со здоровым сосудистым старением наблюдался более высокий уровень ежедневного потребления сладостей. Опубликована оригинальная статья и обзор про супернормальное старение на популяционном уровне;  на популяционном уровне феномен «супернормального» старения сосудов встречается примерно в 10 % случаев без значимого гендерного преобладания. АГ, ожирение и метаболические факторы являются основными причинами, вызывающими старение с наличием возрастных особенностей сохранения идеального состояния сосудов.  Подготовлена статья о динамике распространенности метаболически здорового ожирения и о предикторах сохранения метаболического здоровья. Опубликована статья о связи пищевого поведения и ссудистого старения.

25. Персонифицированный подход к восстановлению репродуктивного здоровья и снижению риска соматической патологии у женщин с овариальной недостаточностью

Установлено, что возраст пациенток, уровень АМГ выше 1 нг/мл и количество полученных ооцитов являются основными факторами, определяющими прогноз лечения бесплодия с применением методов ВРТ у женщин с бедным ответом на стимуляцию суперовуляции. Уровни ФМ и D-д значительно повышаются в ходе реализации программы ВРТ, что может говорить о развитии гиперкоагуляционного синдрома. Повышение уровня ФМ оказалось более значимым, что позволяет рассматривать его как более ранний и специфичный маркер фибринообразования. Разработан алгоритм  дифференциальной диагностики фенотипов преэклампсии; метод обладает 87 % точностью.

Выявлены значимые факторы риска развития гнойно-септических осложнений после родов; установлено, что уровень СРБ выше 60 мг/л на 3 сутки после родов является предиктором развития послеродового эндометрита; разработан способ ранней диагностики развития послеродового эндометрита на основании совместной оценки уровней С-реактивного белка, лейкоцитов, нейтрофилов на 3 сутки после родов. Установлены факторы риска развития послеродовой остеопении.

Доказано, что стандартная профилактическая доза витамина D 400 МЕ не предотвращает развитие остеопении после родов у женщин на фоне лактации.

26. Персонифицированная медицина при выборе стратегии диагностики и лечения сердечной недостаточности, обусловленной ремоделированием сердца при врожденных пороках сердца, нарушениях ритма сердца, и генетически – детерминированных заболеваниях миокарда у детей

Выявлены особенности клинико-морфологического течения кардиомиопатий в зависимости от молекулярно-генетического варианта. Отмечено своеобразие течения редких вариантов кардиомиопатий, таких как  варианты дилатационной КМП, связанной с мутацией в гене RMB30, некомпактный миокард левого желудочка, вызванный мутацией в гене тайтина (TTN).

Дано определение причинной роли укорачивающих форм гена TTN в отношении развития кардиомиопатий и, в частности, некомпактного миокарда левого желудочка, что требует проведения комплексного клинического, сегрегационного и биоинформатического анализа с использованием международных баз данных и применением биоинформатических программных ресурсов. Начат комплексный клинический, сегрегационный и биоинформатический анализ с использованием международных баз данных и применением биоинформатических программных ресурсов.

27. Патогенетическое значение нарушений сна в развитии когнитивных нарушений и эмоционально-волевых расстройств у человека

Определена роль нейротрофического фактора головного мозга в нарушении и реабилитации психических процессов при ишемическом инсульте. Выявлена корреляция концентрации белка BDNF только с одним параметром, а именно объемом очага ишемического инсульта по результатам МРТ (p=0,023). Показана прямая зависимость объема ишемического инсульта и концентрации белка BDNF. Показана высокая встречаемость нарушений дыхания во сне (НДС) у больных с легочной артериальной гипертензией (ЛАГ) и хронической тромбоэмболической легочной гипертензии (ХТЭЛГ). Наличие НДС не ассоциировано с тяжестью легочной гипертензии. Обнаружена взаимосвязь между рядом показателей тяжести НДС и ЭхоКГ показателями ремоделирования левых камер сердца. Тяжесть ночной гипоксемии в обследованной группе ассоциирована с повышением уровня NT-proBNP, что согласуется с представлением об отрицательном прогностическом значении ночной гипоксемии у больных ЛАГ и ХТЭЛГ. Разработан опросник по оценке влияния режима повышенной готовности и требований по самоизоляции в google forms совместно с НМИЦ терапии и ПМ (Москва).

28. Оценка клинико-лабораторных факторов риска развития сердечно-сосудистых осложнений у пациентов с хроническим миелолейкозом на фоне терапии ингибиторами тирозинкиназ

Проспективно изучена  кардиотоксичность ингибиторов тирозинкиназ у пациентов с хроническим миелолейкозом. В исследование было включено 165 пациентов без предшествовавших сердечно-сосудистых событий, начинавших терапию ингибиторами тирозинкиназ или получавших данную терапию не менее 6 мес. Было выявлено, что пациенты, ранее получавшие нилотиниб, имели больше проявлений преклинического атеросклероза (данные ПЛИ и ИМТ), чаще страдали артериальной гипертензией. Метаболические нарушения (гипергликемия, дислипидемия) также чаще выявлялись на фоне терапии нилотинибом. Однако в группе пациентов с низким риском SCORE достоверных отличий между пациентами, получавшими разные ИТК, не было. Хотя у большинства пациентов были признаки миокардиальной дисфункции, частота снижения ФВ оказалась низкой. Кроме того, у части пациентов был выявлен высокий уровень про-BNP, также проведено исследование кардиомаркера ST2, который у подавляющего большинства пациентов был в пределах нормы. Как про-BNP, так и ST2 увеличивались у пациентов с сердечной недостаточностью. Оба показателя коррелировали с уровнем гемоглобина.

Проведенное исследование позволило создать алгоритм ведения пациентов ХМЛ для выявления факторов риска атеросклероза и его преклинических форм с целью снижения риска развития сердечно-сосудистых событий.

29. Оценка безопасности и специфического действия нового лекарственного препарата для лечения и профилактики остеопороза

В рамках доклинического исследования нового препарата,согласно протоколу-заявке IACUC (SF-IAC001-v2.0-Jan 2019) на эксперименте было выполнено моделирование заявленных патологий, проведено сравнительное исследование основных показателей костного ремоделирования при экспериментальном остеопорозе у крыс молодого и сенильного возраста, а также при сочетанной патологии — остеопороза, осложненного сахарным диабетом 2 типа, на фоне различной антиостеопорозной  и сахароснижающей терапии и в комбинации с витамином Д3.

Доказана высокая эффективность   предлагаемого антиостеопорозного средства, которая обусловлена нарастанием органического и минерального компонентов костной ткани.

30. Определение химеризма в субпопуляциях гемопоэтических клеток для разработки алгоритма ранней диагностики рецидивов онкогематологических заболеваний после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

Данное исследование позволило изучить кинетику донорского химеризма в разных субпопуляциях гемопоэтических клеток у пациентов после аллоТГСК.

В ходе исследования выявили слабую корреляцию тотального химеризма с линейноспецифическим химеризмом по CD34+ и лишь умеренную корреляцию с уровнем химеризма по CD3+, что делает исследование линейного химеризма более ранним и чувствительным маркером. Снижение химеризма в CD34+ является предиктором развивающегося рецидива и требует контроля в динамике. Наличие смешанного химеризма по CD3+ не является маркером рецидива, но может предшествовать снижению химеризма по CD34+. Персистенция смешанного химеризма в ранние сроки после аллоТГСК встречается в высоком проценте случаев, чаще в CD3+ положительных клетках, однако их разница статистически незначима.

При проведении иммуно-направленной терапии (ранняя отмена иммуносупрессивной терапии, инфузии донорских лимфоцитов, наличие смешанного химеризма в ранние сроки после ТГСК не является фактором, определяющим развитие рецидива заболевания, однако данные пациенты требуют пристального наблюдения и частого мониторинга линейного химеризма. Восстановление полного линейного химеризма в ответ на терапию является фактором благоприятного прогноза. Дальнейшее прогрессирующее снижение линейного химеризма требует смены тактики воздействия.

На основании полученных данных был скорректирован подход к посттрансплантационной терапии на основании данных линейного химеризма. Проводится внедрение полученных результатов в клиническую практику.

31. Молекулярно-генетические механизмы ремоделирования сердца и маркеры прогноза течения ХСН у больных с постинфарктным кардиосклерозом

Проанализированы результаты о наличии укорачивающих и редких вариантов гена тайтина (TTN) у пациентов с ПИКС и фракцией выброса ЛЖ < 35 %. Обнаружено, что в исследуемой популяции пациентов частота укорачивающих вариантов, коротких вставок или делеций, не нарушающих рамку считывания гена TTN, превышает количество соответствующих вариантов, обнаруженных в условно здоровой популяции в зарубежных исследованиях. Показано, что МСС терапия у пациентов с ХСН, низкой фракцией выброса и синусовым ритмом ассоциирована со значительным уменьшением госпитализаций по причине декомпенсации ХСН; выживаемость на фоне МСС в течение 2х лет у пациентов с ХСН II-III ФК составила 80 %, а наличие ПИКС негативно влияет на тренд параметров обратного ремоделирования миокарда и маркер миокардиального стресса NtproBNP.

Выявлено преимущество аэробных тренировок у больных ХСН, рассчитанных на основании индивидуализированного определения физиологических фаз адаптации к нагрузке, в отношении положительного влияния на выраженность ХСН, развития инверсии ремоделирования миокарда и морфо-функциональных характеристик скелетной мускулатуры.

Гистологический анализ биоптатов поперечно-полосатой мышечной ткани показал существенное уменьшение толщины эндомизия и диаметра мышечного волокна на фоне индивидуализированной ФР у пациентов с ХСН III ФК, что может отражать стабилизацию механизмов механотрансдукции.

32. Инновационный цифровой рентгенодиагностический комплекс для неонатологии и педиатрии

Разработаны технические средства рентгенодиагностики, в том числе, рентгеновские аппараты, цифровые системы визуализации и штативные устройства (далее рентгенодиагностические комплексы – РДК) в портативном исполнении для неонатологии и портативно-передвижном исполнении для педиатрии.

Разработана методика малодозовой микрофокусной рентгенодиагностики, в том числе определены рентгенооптические и геометрические условия съемки, различные режимы съемки, предложены специальные укладки при рентгенографии новорожденных и детей в возрасте до трех лет (неонатологии и педиатрии).

33. Изучение эпигеномных и микробиомных механизмов развития некротического энтероколита у новорожденных с целью выявления предикторов, разработки новых профилактических и терапевтических стратегий

Выявлено, что детей с некротическим энтероколитом (НЭК) при отсутствии обеднения мезентериального кровотока после операции, имелась большая длительность инотропной поддержки (4-11 и 1-3 сут). Отмечена контаминация желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) нозокомиальной флорой у детей , перенесших оперативное лечение ВПС. Выявлено, что НЭК у детей с критическими ВПС был ассоциирован с увеличением количества Escherichia/Shigella (класс Gammaproteobacteria), а также Clostridium (класс Clostridia). Отмечено вялое сосание, трудности, связанные с кормлением из рожка у детей, имевших обеднение мезентериального кровотока после операции.

Спустя месяц после операции половине детей, имевших обеднение мезентериального кровотока после операции, требовалось зондовое питание. Выявлена значимо большая продолжительность пребывания в стационаре после операции у пациентов с обеднением мезентериального кровотока. Более позднее начало питания из рожка (без докорма через зонд) ассоциировалось большей длительностью пребывания в стационаре после операции.

Отмечено, что в послеоперационном периоде трудности энтерального питания детей, перенесших радикальную операцию ВПС, несмотря на отсутствие обеднения мезентериального кровотока, были связаны со сроком оперативного лечения, наличием инфекции ЖКТ, отсроченным закрытием стернотомной раны, течением пневмонии, нарушениями ритма сердца.

34. Кальцификация клапанов сердца: поиск новых мишеней для персонифицированных терапевтических воздействий

Завершено первичное обследование пациентов с легким/умеренным и тяжелым аортальным стенозом, которым было выполнено ПЭТ/КТ с 18F-NaF и  с 18F-ФД для выявления прогностических маркеров прогрессирования аортального стеноза. Показано, что воспалительный процесс по данным ПЭТ/КТ с 18F-ФДГ вносит минимальный вклад в прогрессирование АС. В то время как ПЭТ/КТ с 18F-NaF может использоваться для прогнозирования темпов прогрессирования заболевания у пациентов с различной морфологией аортального клапана. Кальцификация сосудистой стенки, как и кальцификация клапанов сердца, представляет собой активный, программируемый процесс, в регуляции которого участвуют многочисленные сигнальные пути.

Была продемонстрирована дозозависимая Notch активация генов RUNX2, OPN и POSTN, ответственных за остеогенную трансформацию гладкомышечных клеток аорты. Способность гладкомышечных клеток аорты приобретать остеогенный фенотип определялась межклеточным взаимодействием с эндотелиальными клетками и зависела от их функционального состояния.

35. Изучение влияния разных способов снижения веса на фертильность и микробиом женщин с синдромом поликистозных яичников и ожирением

Изучено влияние низкоуглеводной диеты на антропометрические, репро-дуктивные и метаболические параметры у женщин с СПКЯ. Выявлено положительное влияние данной диеты в виде значимого снижения индекса массы тела (ИМТ), артериального давления, уровня триглицеридов и АЛТ у женщин с СПКЯ и избыточным весом. В группе женщин с СПКЯ и ИМТ

Восстановление овуляции при мониторинге фолликулогенеза было зафиксировано у 48 % женщин с СПКЯ, завершивших исследование: у 54 % женщин с избыточным ве-сом/ожирением и у 40 % женщин с нормальным весом.

В ходе исследования было проведено сравнение состава кишечной микрофлоры у женщин с СПКЯ и контрольной группы, изучение влияния низкоуглеводной диеты на кишечную микрофлору, что может привести к улучшению общих симптомов и фертильности у женщин с СПКЯ. Также были выявлены различия в бета-разнообразии микробиоты у женщин с нормальным весом из группы СПКЯ и группы контроля.

36. Изучение механизмов вегетативной регуляции кровообращения и разработка методов диагностики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний на основе воздействия на автономную нервную систему

В результате исследования периартериальной жировой клетчатки лдегочной артерии у человека и свиньи были выявлены различия в плотности и диаметре нервных волокон, однако глубина их залегания не различались. В целом, у человека и свиньи наблюдается сходный рецепторный профиль. Следует отметить меньшую выраженность экспрессии всех исследованных маркёров у свиньи в сравнении с человеком.

На основании полученных данных можно утверждать, что экспериментальная модель денервации легочной артерии у свиней может являться адекватной для экстраполяции результатов катетерного повреждения у человека. Отработана методика индукции управляемой легочной артериальной гипертензии на свиньях с применением внутривенного введения синтетического аналога тромбоксана А2. Получены данные о влиянии радиочастотной аблации симпатических нервов почечных артерий на изменение гемодинамики малого круга кровообращения, в том числе продемонстирована потециальная возможность снижение легочного сосудистого сопротивления при аблации почечных артерий.

Полученные результаты демонстрируют возможности применения различных систем для денервации почечных артерий. Показано, что применение спирального типа катетера предоставляет больше возможностей для проведения более расширенной денервации сегментов артерии. При использовании баллонной радиочастотной денервации необходима оценка углов изгиба артерии перед инфляцией баллона.

37. Изучение роли нейровоспаления и нейрональной аккумуляции железа в патогенезе болезни Паркинсона и болезни Альцгеймера

При введении ЛФ в дозе 300 мг/кг в течение 4-х дней (1 раз в день), начиная с первого введения МФТП, наблюдалось усиление токсического действия нейротоксина, что выражалось в смертности животных, усугублении дофаминергического дефицита (тест «вертикальный стержень») и изменении гематологических показателей (повышение количества гранулоцитов, снижение концентрации гемоглобина и среднего объема эритроцитов, снижение тромбокрита и количества тромбоцитов). При этом ЛФ способствовал ослаблению постурального синдрома (тест «бар») и уменьшению спастического синдрома в тесте «жердочка», снижению активности эластазо- и трипсиноподобных протеиназ (плазма, печень), повышению активности альфа-1-протеиназного ингибитора (головной мозг, печень), снижению показателей перекисного окисления липидов и окислительной модификации белков.

Таким образом, доказано, что рекомбинантный человеческий апо-лактоферрин обладает антипаркинсоническим действием и может рассматриваться в качестве перспективного кандидата на роль противопаркинсонического лекарственного средства.

38. Защита миокарда от ишемического и реперфузионного повреждения путем направленной доставки препаратов, стабилизирующих мембраны тучных клеток

Разработан способ защиты миокарда от ишемически-реперфузионного повреждения с использованием инкапсулированного в липосомы квинакрина. Квинакрин (5 мг/кг), введённый внутривенно в начале реперфузии миокарда, на 26 % уменьшает размер инфаркта, в сравнении с контролем (патент RU 2716596 C1, 2020), при этом не уменьшает степень функциональной активности тучных клеток. Инкапсуляция квинакрина в липосомы размером 30 нм повысила кардиопротективную эффективность раствора квинакрина в той же дозе, уменьшив на 40 % размер инфаркта миокарда по сравнению с контролем. Повышение кардиопротективного эффекта квинакрина после его инкапсуляции в липосомы, вероятно, связано с защитным эффектом фосфолипидов, входящих в их состав, поскольку ненагруженные липосомы, как оказалось, обладают достоверным инфаркт-лимитирующим эффектом. Инкапсуляция квинакрина в липосомы не увеличивает его накопление в зоне повреждения миокарда, хотя и усиливает инфаркт-лимитирующий эффект.

Внутривенное введение липосомальной формы квинакрина вызывает краткосрочное повышение уровня среднего артериального давления и снижение частоты сердечных сокращений.

Кардиопротективный эффект квинакрина не опосредован уменьшением функциональной активности тучных клеток. Работы по отчетному этапу выполнены полностью.

39. Изучение механизмов повреждения сердечно-сосудистой системы при гипо- и гиперпаратиреозе с целью разработки комплексного персонифицированного подхода обследования и лечения

Ретроспективно оценены клинические формы ПГПТ у 449 больных, поступивших в три стационара города для оперативного лечения. Установлено, что среди больных ПГПТ большинство имело манифестную форму заболевания, что связано с отсутсвием скиринга на определение уровня кальция в популяции, а также редким определением уровня обеспеченности витамином D у данной когорты больных. Также в рамках исследования была произведена оценка влияния исходного статуса витамина D на проявления гипокалдьциемии в последоперационном периоде. Проведён анализ качества жизни больных с послеоперационным гипопаратиреозом. Начат набор больных в проспективное исследование с оценкой параметров сердечно-сосудистого ремоделирования и обратимости изменений после паратиреоидэктомии. До и после оперативного лечения были обследованы 42 больных ПГПТ.  Начато формирование базы даннных больных с гипопаратиреозом различной этиологии (послеоперционной, аутоиммунной).

40. Изучение связи функции щитовидной железы и показателей йодобеспечения до и во время беременности с неблагоприятными последствиями беременности и исходами у детей с целью оптимизации рекомендаций по их профилактике

Выявлено, что субклинический гипотиреоз матери во время беременности связан с более высоким риском развития маловесного к сроку плода и более низкой массой тела при рождении, в то время как изолированная гипотироксинемия ассоциирована с более низким риском рождения маловесного плода и более высокой массой тела при рождении.

Данные, полученные в ходе данного исследования, интегрированы в базу данных международного консорциума «Щитовидная железа и беременность». На данном этапе проведен мета-анализ данных отдельных участников исследований в отношении связи функции щитовидной железы с весом новорожденных.

Субклинический гипотиреоз матери во время беременности был связан с более высоким риском развития маловесного к сроку плода и более низкой массой тела при рождении, в то время как изолированная гипотироксинемия ассоциирована с более низким риском рождения маловесного плода и более высокой массой тела при рождении.

41. Метод оценки уровня минимальной остаточной болезни (МОБ) у пациентов с впервые выявленным острым миелоидным лейкозом в постиндукционном периоде

Предложен алгоритм определения тактики ведения данных пациентов с включением в терапию аллоТКМ в первой ремиссии заболевания, проводится его проверка и отработка. Завершается биобанкирование образцов костного мозга и периферической крови при верификации диагноза и на постиндукционном этапе для последующего молекулярно-генетического анализа.  Отработана методика выполнения оценки уровня минимальной остаточной болезни (МОБ)  на группе пациентов с впервые выявленным ОМЛ, продолжен набор материала. Проводится оформление единой базы сведений о пациентах, включающуя в себя демографические, клинические и биологические данные каждого пациента.

42. Разработка методов снижения риска коронарных событий у пациентов с ишемической болезнью сердца при плановом хирургическом вмешательстве на периферических артериях и аорте

Определен риск развития периоперационных кардиальных осложнений у больных, подвергавшихся эндопротезированию аорты, брахиоцефальных и артерий нижних конечностей. Сформирована база данных больных с поражением аорты, брахиоцефальных и артерий нижних конечностей, прооперированных в отделении сердечно-сосудистой хирургии в 2018—2019 гг.

В результате проведенного исследования выявлены особенности требований к предоперационному обследованию больных, направляемых для хирургического лечения, а также ко вторичной профилактике, проводимой на догоспитальном этапе у больных с атеросклеротическим поражением сосудов.

43. Разработка прогностических шкал для определения клинического течения нейроэндокринных заболеваний с целью персонификации лечебной тактики

На основании анализа данных предоперационного и послеоперационного обследования пациентов с БК и акромегалией, были определены  параметры (МРТ гипофиза с контрастированием, предоперационный БДТ,  утренний кортизол сыворотки на 2-3 сутки после операции) и определены их значения, позволяющие прогнозировать ремиссию гиперкортицизма после ТСА.  Также продемонстрировано, что уровень гормона роста, определенного через сутки после ТСА, <1,30 нг/мл с  чувствительностью 96,2 % и специфичностью 84,2 % может быть использован в качестве  прогностического фактора ремиссии акромегалии после хирургического вмешательства. Полученные данные могут быть использованы в определении тактики ведения пациентов с акромегалией и болезнью Кушинга после операции

44. Транскриптомные биосигнатуры клеток периферической крови для оценки прогноза течения некоронарогенных заболеваний миокарда

Было обследовано 23  пациента с миокардитом, у которых проведен анализ экспрессии генов в мононуклеарных клетках периферической крови, выявлены гендерные различия в экспрессии генов, а также отличия в профилях экспрессии генов в биоптатах миокарда и  клетках периферической крови. Также было отмечено снижение экспрессии для восьми генов (CD1D, NF-kB, IL2, SEC24A, NOTCH2, ACOX1, HRH3, SEC24D) в клетках периферической крови по сравнению с образцами миокарда. В то же время экспрессия четырех генов (FCER1G, ITGB2, GLIPR1, TMOD3) была выше в клетках периферической крови. Подготовлены библиотеки для полногеномного профилирования экспрессии генов в мононуклеарных клетках периферической крови у больных с морфологически документированным миокардитом.

Проведено когортное исследование пациентов с патологией перикарда по обращаемости с целью выявления пациентов с идиопатическим миокардитом в качестве группы сравнения с аутовоспалительным генезом заболевания.

45. Создание Центра дистанционного мониторирования физиологических параметров пациента высокого сердечно-сосудистого риска и персонифицированных алгоритмов принятия  решения на основании полученных данных  в режиме реального времени

Разработаны общие требования к работе и схема работы автоматизированного комплекса дистанционного мониторинга и экстренного реагирования; разработаны требования и принципиальный дизайн периферического устройства и центра дистанционного мониторирования физиологических параметров пациентов высокого сердечно-сосудистого риска; разработан список параметров (тревог) для анализа автоматизированной системой мониторирования и их соответствие цветовой шкале индикации;  разработан регламент взаимодействия оператора центра дистанционного мониторинга со службами экстренного реагирования; создана комплексная база данных риск-предикторов неблагоприятных событий (особенно внезапной смерти) с их ранжированием по простоте применения, относительному риску, чувствительности, специфичности и прогностической ценности у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями для определения категории пациентов высокого сердечно-сосудистого риска, в наибольшей степени нуждающихся в наблюдении в дистанционном центре онлайн-мониторирования; сформирована база данных цифровых ЭКГ пациентов с COVID-19 и созданы датасеты с электрокардиографическими, клиническими, лабораторными и инструментальными параметрами пациентов с COVID-19 для дальнейшего поиска риск-предикторов в отношении тяжести и исхода заболевания.

46. Разработка противомикробного ранозаживляющего препарата на основе наночастиц серебра

Разработана методика создания антибактериальных препаратов на основе наночастиц серебра. Проведен синтез квазисферических AgNP и стабилизация их несколькими способами: золь-гель метод синтеза, хелатироование альбумином, загущение аэросисом, инкорпорация в сфера-спектр для дальнейшего использования в лекарственных формах наружного применения.

Выявлено, что применение авторских микросфер сопровождается более выраженным угнетением инфекции и способствует регенерации предварительно инфицированной кости.

Полученные результаты будут использованы для разработки противобактериальных и противоязвенных препаратов.

47. Разработка минимально-инвазивных персонифицированных технологий хирургического лечения пациентов с заболеваниями позвоночника

Показана эффективность хирургических имплантаций с применением индивидуальных 3D навигационных направителей при различных патологических состояниях во всех отделах позвоночного столба. Выявлено влияние предоперационной химиоэмболизации на редукцию собственной сети опухоли, уменьшение интраоперационной кровопотери и достижение локального контроля опухоли при первичном и вторичном опухолевом поражении позвоночника.

Проведено сравнение клинической эффективности эндоскопической декомпрессии и открытых декомпрессивно-стабилизирующих вмешательств в лечении патологии позвоночника. Показано, что применение данной нейрохирургической технологии позволяет улучшить качество жизни пациентов при различных патологических процессах в позвоночнике.

48. Разработка методов диагностики и терапии новой нозокомиальной инфекции, обусловленной Candida auris

Выявлены микромицеты вида Candida auris в различных биосубстратах пациентов многопрофильного стационара. Начато формирование криобанка госпитальных штаммов Candida auris (22 штамма). Проведена видовая идентификация криобанкированных штаммов методом MALDI-TOF масс-спектрометрии. Определена резистентность к флуконазолу C. auris методом серийных разведений.

Выявили резистентность всех криобанкированных выделенных от пациентов штаммов Candida auris к флуконазолу — препарату выбора при терапии микозов, обусловленных дрожжевыми микромицетами.

49. Усовершенствование технологии производства и разработка стандарта качества радиофармацевтического препарата [68Ga]— PSMA, меченого лиганда, для диагностики рецидива и метастазов рака предстательной железы методом позитронной эмиссионной томографии

Разработан усовершенствованный способ синтеза препарата [68Ga]-PSMA. Для эффективного применения данного способа был сконструирован и изготовлен модуль синтеза DATVOS. На разработанную программу управления устройством для синтеза препарата получено Свидетельство о государственной регистрации. На сам модуль синтеза получен патент на полезную модель. Разработаны методы контроля качества препарата [68Ga]-PSMA, в том числе оригинальная методика определения химических примесей методом высокоэффективного электрофореза. Было наработано более 320 серий препарата. Показано, что полуавтоматический модуль синтеза в совокупности с разработанным программным обеспечением работает с требуемой надежностью и позволяет получать препарат надлежащего качества с воспроизводимыми свойствами. Разработана необходимая нормативно-техническая документация для изготовления препарата [68Ga]-PSMA.

Высокая эффективность разработки подтверждается тем, что еще до официального окончания данной научно-исследовательской работы ее результаты были внедрены: в центре ПЭТ ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России по разработанному процессу приступили к регулярному изготовлению препарата [68Ga]-PSMA.

50. Разработка и оптимизация протокола тестирования токсичности веществ с молекулярной массой более 3 кДа (Zebra fish) на рыбах

Выявлен наиболее оптимальный метод дехорионизации эмбрионов Danio rerio – неполного механического удаления хориона. Определены ограничения и оптимальные условия для реализации модифицированного теста эмбриотоксичности рыб для высокомолекулярных соединений. На примере исследования токсичности высокомолекулярного катиона Luviquat FC 550 показано влияние дехорионизации на результаты теста эмбриотоксичности рыб. Исследованы три типа непокрытых металлосодержащих наночастиц: из меди — менее 50 нм (НЧ-Cu50), из оксида цинка — около 50 нм (НЧ-ZnO50) и из диоксида титана — 70 нм (НЧ-TiO270) в условиях модифицированного протокола эмбриотоксичности рыб. Показана важная роль окислительного стресса в токсических эффектах наночастиц меди и оксида цинка в условиях стимулирорвания антиоксидантной системы зебрафиш при добавлении в среду N-ацетилцистеина. Исследованы два типа неметаллосодержащих наночастиц: фуллерен С60 и диоксид кремния (НЧ-SiO2) — а также биодеградируемое высокомолекулярное соединение низкомолекулярный хитозан) в условиях модифицированного протокола эмбриотоксичности рыб. Определена зависимость результатов теста эмбриотоксичности от сроков удаления хориона для наночастиц фуллерена С60, НЧ-SiO2 и низкомолекулярного хитозана.

51. Оценка мутаций генов, ответственных за эпигенетическую регуляцию генома (DNMT3A, IDH1, IDH2, ASXL1), у пациентов с острым миелобластным лейкозом низкого и промежуточного риска в дебюте заболевания и в постиндукционном периоде

В ходе исследования выполнен анализ при помощи отработанных методик определения мутаций генов DNMT3A, IDH1, IDH2, ASXL1 у 56 пациентов. Мутационный статус генов эпигенетической регуляции IDH1, IDH2 DNMT3A и ASXL1 определяли методом секвенирования по Сэнгеру. Мутации генов эпигенетической регуляции были обнаружены у 14 (25,0 %) из 56 пациентов. Распространенность мутаций не была ассоциирована с группами риска (р=0,072). Мутации IDH1/2 были выявлены у 15,6 % пациентов и достоверно чаще обнаруживались совместно с мутациями NPM1 (62,5 %, p= 0,01) в сравнении с пациентами с диким типом IDH1/2. У большинства пациентов мутации IDH1/2 были ассоциированы с нормальным кариотипом (р=0,002). Мутация DNMT3A (R882) была определена у 4/56 (7,1 %) пациентов анализируемой группы. У 6 пациентов (11,1 %) были идентифицированы мутации ASXL1, которые сочетались с RUNX1-RUNX1T1 и FLT3-ITD. Выявление мутаций генов эпигенетической регуляции не оказывало влияние на достижение ПР как в случае каждой отдельной мутаций, так и в общей группе(р=0,7, р=0,3, р=0,4, р=0,08 соотв.). Выявление этих мутаций в дебюте заболевания не оказывало влияние на БРВ как в каждом отдельном случае, так и в общей группе(р=0,9, р=0,07, р=0,26, р=0,9 соотв.) Мутации генов эпигенетической регуляции с высокой частотой сочетались с другими генетическими аберрациями.

Выявленное отсутствие достоверного влияния мутаций DNMT3AR882, IDH1/2 и ASXL1 на частоту достижения ремиссии и БРВ согласуется с литературными данными. Влияние на исход заболевания, вероятно, связан с вариантами сочетания генетических аномалий и с глубиной ответа.

52. Прогностическое значение комплексного кариотипа и динамики клона del17p/mutTP53 при таргетной терапии хронического лимфолейкоза

Выявлены корреляции с прогнозом динамики клона c мутацией TP53: установлена прогностическая роль del (17p), мутаций TP53 и комплексного кариотипа у больных с хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), получающих терапию ибрутинибом и венетоклаксом. Получены данные, указывающие на более высокую эффективность данных препаратов у пациентов с одной линией терапии в анамнезе, без del (17p13) и точечных мутаций гена TP53, а также без комплексного кариотипа (менее 3 хромосомных поломок по данным кариотипирования с адекватной митогенной стимуляцией). Сформулированы рекомендации по ведению больных ХЛЛ с факторами рисками.

Продолжается наблюдательное клиническое исследование IB-RU-SCOPE, внесение данных в электронную базу данных для дополнительных исследований.

53. Разработка автоматизированной системы выбора метода лечения при сахарном диабете 2 типа

Выявлено благоприятное влияние метформина на липидный спектр по сравнению с препаратами сульфанилмочевины. Показано, что данные липидного спектра могут использоваться как дополнительный предиктор улучшения метаболических показателей на фоне терапии метформином. Показано, что снижение уровня фобической тревожности (проработка страхов) и замкнутости (социальное раскрепощение) с помощью психокоррекционной работы с пациентом более успешно способствует снижению веса больного после бариатрической операции. Отмечено, что  обучение пациентов с учетом их психологических особенностей является одной из дополнительных, и весьма важных, ступеней в лечебной тактике. Результаты проведенного исследования являются обоснованием персонифицированного систематизированного подхода в разработке автоматизированной системы выбора метода лечения сахарного диабета в современных условиях.

54. Доклиническое исследование нового баллонорасширяемого голометаллического стента с системой доставки для лечения хронического расслоения аорты III типа (по DeBakey)

В ходе выполнения государственного задания путем интерпретации сведений, полученных при обследовании пациентов, госпитализированных по поводу заболеваний аорты, создана математическая модель кровотока в ее просвете. Оценены параметры гемодинамики при различных анатомических особенностях патологических изменений в сосуде. Смоделирована ситуация имплантации голометаллического стента в область аневризматического расширения аорты. Созданные на основании математического анализа образцы голометаллического стента успешно прошли доклинические испытания на опытных животных, показав безопасность их применения.

55. Разработка и внедрение нового метода неинвазивного определения содержания железа в печени и миокарде по данным магнитно-резонансной Т2*-релаксометрии для оценки эффективности терапии хелаторами железа и планирования трансплантации костного мозга

Установлено, что у пациентов с нормальными, но пограничными, показателями ферритина сыворотки крови уже имеется легкая степень перегрузки печени железом. Факт легкой степени перегрузки свидетельствует о наличии в организме источника воспаления. У пациентов с умеренными (средними) степенями перегрузки железом встречались как пограничные с нормой показатели ферритина сыворотки крови, так и экстремально низкие для данной степени перегрузки значения ферритина сыворотки крови.

Показана высокая эффективность магнитно-резонансной Т2*-релаксометрии, как неинвазивного метода объективной количественной оценки перегрузки железом у пациентов гематологического профиля, в сравнении с показателем сывороточной концентрации ферритина, не являющимся специфичным.

56. Долгосрочные эффекты дефицита витамина D: персонифицированный подход к профилактике и терапии кардиоваскулярных и метаболических заболеваний

Установлено, что оптимальная концентрация 25 (ОН) D в сыворотке крови для уменьшения уровня HbA1c у женщин с предиабетом составляет 33,1 нг/мл. Уровень обеспеченности витамином D не зависит от носительства BsmI, ApaI, TaqI и FokI полиморфизмов гена рецептора витамина D, однако носительство определенных полиморфизмов (ВВ генотип BsmI полиморфизма) может быть ассоциировано с повышением уровня атерогенных липоротеинов, в частности ХС-ЛПНП.

Доказано, что оптимальная концентрация 25 (ОН) D в сыворотке крови у больных СД 2 типа необходимая для снижения уровня ИЛ-6 и повышения уровня ИЛ-10 составляет более 43 нг/мл, что соответствует целевым показателям 25 (ОН) D, рекомендованным Российской ассоциаций эндокринологов. Редкое определение 25 (ОН) D в сыворотке крови у больных ПГПТ и отсутствие восполнения дефицита витамина D может искажать истинное количество больных с нормокальциемической формой заболевания. Гипокальциемия в послеоперационном периоде может быть ассоциирована с низким уровнем обеспеченности витамина D до операции, в связи с чем необходимо проведение дополнительных исследований, включая определение 25 (ОН) D. Носительство FokI полиморфизма у больных рассеянным склерозом  не отличается от такового в общей популяции и связано с течением основного заболевания.

Таким образом, что с учетом сохраняющейся высокой распространенности недостатка и дефицита витамина D во всем мире, включая РФ, необходимо констатировать тот факт, что генетические предикторы могут реализовать или не реализовать свои эффекты в условиях недостаточного уровня обеспеченности витамином D.

57. Разработка аллогенных опухоль-специфичных Т-лимфоцитов с химерным антигенным рецептором к антигену CD19

Разрабатывалась технология получения аллогенных CAR-T клеток и проверка их активности как in vitro, так и in vivo. Экспериментально подтверждена в in vitro и in vivo тестах избирательная цитотоксическая активность CAR-T по отношению к клеткам мишеням экспрессирующим CD19 (перевиваемые опухолевые линии). Наработка лентивирусного вектора CAR и получение CAR-T одновременно несущих CAR и системы модификации Т-клеток, реализованы составлением соответствующих протоколов получения аллогенных CAR-T. Также была произведена наработка целевых лентивирусных векторов в объеме, необходимом для оценки функциональной активности in vitro и противоопухолевой активности in vivo. Отработан метод получения жизнеспособных CAR-T клеток путем лентивирусной трансдукции Т-лимфоцитов условно здоровых доноров.

58. Разработка подходов для связывания и инактивации вируса sars-cov-2 в организме пациента с COVID-19 и экстракорпорально с использованием рекомбинантных генноинженерных белков

Проводились работы по созданию системы быстрого реагирования, позволяющей перехватывать вирусные патогены, подставляя для аффинного связывания артефактные мишени в виде рекомбинантных рецепторных белков человека. Подобная система способна на производство таких артефактных мишеней в сжатые сроки, необходимые для эпидемиологического ответа на актуальные вызовы.

Выявлена тропность вируса SARS-CoV-2 к экстрацеллюлярной части рецепторов АСЕ2 и DPP4, а также участие TMPRSS2 и FURIN в его активации.  Доказана возможность создания наноструктуры, несущей на поверхности сайты связывания для вируса (биологически активные рекомбинантные белки ACE2, DPP4, FURIN и TMPRSS2) в различных комбинациях и обладающей преимуществом в образовании такой связи перед клетками-мишенями.

Разрабатывали систему быстрого реагирования, позволяющую перехватывать вирусные патогены, подставляя для аффинного связывания артефактные мишени в виде рекомбинантных рецепторных белков человека. Данная система способна осуществлять производство таких артефактных мишеней в сжатые сроки, необходимые для эпидемиологического ответа на актуальные вызовы.

Результаты выполненных исследований позволят создать широкий спектр изделий для применения в медицинской практике, от высокочувствительных и специфичных тест-систем до лекарственных средств нового поколения.